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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

[求助] 要对猪肝提取液进行dna提取,选哪种试剂盒 已有2人参与

本人新手,刚接触实验,对猪肝提取液进行dna提取,不知道样品预处理和试剂盒选用方面怎么处理,请教有经验的给些建议

@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫IOS客户端
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哈哈
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sungel

银虫 (初入文坛)

2楼2016-11-07 17:02:58
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杜一无二

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
哈哈,我上次做过 扁桃体的,动物的,用的宁波有成生物的基因组DNA提取试剂盒,你可以试试。如果需要我给你引荐给你。

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3楼2016-11-08 10:01:25
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lvshilu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好!肝脏是普通的动物细胞,只要你找的试剂盒适合动物细胞提取就行了,大概要先把肝脏磨成细胞悬液吧,然后离心收集细胞,上试剂盒的裂解液,按照kit protocol就可以了。
提genomic DNA很简单的,新手不要害怕,只要细胞破壁(膜);DNA不被破坏;DNA被结合或沉淀;蛋白分离出去。注意好这些点就行了。祝顺利!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

需要金币
4楼2016-11-08 10:39:16
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by lvshilu at 2016-11-08 10:39:16
你好!肝脏是普通的动物细胞,只要你找的试剂盒适合动物细胞提取就行了,大概要先把肝脏磨成细胞悬液吧,然后离心收集细胞,上试剂盒的裂解液,按照kit protocol就可以了。
提genomic DNA很简单的,新手不要害怕,只 ...

我这个是肝脏提取液,不清楚是不是细胞已经破碎了,如果是肝细胞应该动物基因提取试剂盒就可以,我现在发愁的就是这个肝脏提取液的主要成份是什么,怎么预处理后用试剂盒提取dna 。刚接触这种实验,好多都是网上边查边学的

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哈哈
5楼2016-11-08 12:09:48
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 杜一无二 at 2016-11-08 10:01:25
哈哈,我上次做过 扁桃体的,动物的,用的宁波有成生物的基因组DNA提取试剂盒,你可以试试。如果需要我给你引荐给你。

你是直接用扁桃体组织做的吗,我这个是肝脏的提取液,应该是肝组织加工过,不知道样品中的dna含量多少,什么存在形式,我估计的,做成提取液的过程,肝细胞应该已经破碎了吧?

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哈哈
6楼2016-11-08 12:14:19
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sungel at 2016-11-07 17:02:58
组织细胞提取试剂盒

谢谢

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7楼2016-11-08 12:14:36
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

太多了,随便找个公司的 组织dna提取。常见的 国外的 promega  . omega.  国内的  天根

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8楼2016-11-08 13:47:40
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杜一无二

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
guishuai_tj: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-12-30 16:20:54
引用回帖:
6楼: Originally posted by guishuai_tj at 2016-11-08 12:14:19
你是直接用扁桃体组织做的吗,我这个是肝脏的提取液,应该是肝组织加工过,不知道样品中的dna含量多少,什么存在形式,我估计的,做成提取液的过程,肝细胞应该已经破碎了吧?
...

您好,开始做肝脏的DNA提取是是要先研磨的,完全是可以的,DNA还在的。
另外不要害怕是新手,实验者东西是操作出来的,多做几次就好,有什么疑问可以随时问我,我做的DNA提取比较多,列如石蜡,血液,唾液,基因,是没有问题。
9楼2016-11-08 14:01:15
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