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急需各位大神帮助!!!!!生化分析仪测定SOD活性(邻苯三酚法) 已有1人参与
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| 各位大神,想请教一下用生化分析仪测血清中SOD得问题。买的试剂盒用的是终点法,原理是:邻苯三酚碱性环境中自氧化产生有颜色的中间产物和超氧阴离子,SOD催化超氧阴离子发生歧化反应,样本中SOD的活性与反应体系的显色反应强度成正相关。从购买试剂的定标曲线来看,此反应是个正反应,随着SOD浓度的增加反应速率增大,吸光值增大。但是,按照此方法我自己配置的试剂测定时定标的曲线是个负反应,测定原理和结果与购买试剂完全不一样。按照邻苯三酚法测SOD的原理来讲,SOD可以抑制邻苯三酚的自氧化,因为SOD可以催化中间产物超氧阴离子发生歧化反应,使另一种中间产物半醌不能被超氧阴离子氧化成有强吸收峰的醌,因此,该反应应该是个降反应,即随着SOD浓度的增加,反应速率降低,吸光值减少。为什么买的试剂盒与自己配置的完全不一样?急求各位大神答疑解惑!谢谢! |
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