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丫丫2016银虫 (正式写手)
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基因组甲基化(MSAP)的选扩问题
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MSAP,现在做了一轮预扩增了,要进行选择性扩增了,但是要合成那些选择性扩增的引物呢?两种酶(EcoR I 和HpaII /MspI)的选择性扩增引物该怎么筛选? 我的两段预扩增引物分别是: EcoR I 引物:GACTGCGTACCAATTC; HpaII /MspI引物:ATCATGAGTCCTGCTCGG。 那么,有以下几个问题: 1、EcoR I 的选择性引物 是不是在预扩引物后面直接加两个碱基就行了? 这两个碱基的组合方式有16种,是不是每一种都要尝试,然后根据后面的聚丙烯酰胺凝胶电泳来筛选比较好的?(一般是在预扩引物后面加几个碱基呢?看文献看不懂,都看晕了。。) 2、HpaII /MspI 的选择性引物一般是在HpaII /MspI 预扩增引物后面加3个还是4个碱基呢???(或者加2个碱基也行??)是不是也是每一种都要去尝试? 谢谢大家的关注~!!!期待你的帮助!!!@biostar2009@wizardfan@youlinglyw@飞约疯人院 |
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2楼2018-07-10 16:59:08










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