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Fayfan

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr问题 已有1人参与

taq酶能p出条带primestar却p不出条带

@天使托 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-11-02 23:44:18
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)
模版用的什么，程序用的什么

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2楼2016-11-03 00:09:44
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Fayfan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张凡云 at 2016-11-03 00:09:44
模版用的什么，程序用的什么

模板用的是提取的总dna,程序是95℃预变性10min，95℃30s,50℃30s,72℃55s,30循环，72℃10min

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3楼2016-11-03 00:56:27
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)
第一种可能，模版纯度不够，高保真酶的模版纯度要求高;第二，高保真酶不是用98度吗

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4楼2016-11-03 10:23:43
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Fayfan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张凡云 at 2016-11-03 10:23:43
第一种可能，模版纯度不够，高保真酶的模版纯度要求高;第二，高保真酶不是用98度吗

但是有人用我的模板浓度还没我的高，用不同的引物同样的浓度p出来了，而且这个酶我们一直用95℃

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5楼2016-11-03 11:47:10
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)
浓度不等于纯度

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6楼2016-11-03 17:39:31
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
常有的事，估计是条件或引物的问题，你优化一下条件或换个引物
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···
7楼2016-11-03 21:59:26
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田生帅菜

新虫 (正式写手)
这两个酶早都被我们实验室淘汰了，可以换很多新产品，具体自己查查。给的建议是做退火温度的梯度PCR。

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8楼2016-11-05 21:11:35
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