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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 做炎性小体的大神看过来，求问上清蛋白检测IL-1β Caspase-1
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三爷111

金虫 (小有名气)

[求助] 做炎性小体的大神看过来，求问上清蛋白检测IL-1β Caspase-1 已有1人参与

最近在做炎性小体相关的课题，在BMDM上做的，按照文献里面最常见的LPS和ATP的用量刺激的细胞，做过N次，发现用WB总是检测不到上清里面的IL-1β以及Caspase-1-P20，胞质里面也跑不出IL-1β和Caspase-1-P20条带来，但是pro-IL-1β和pro-Caspase-1能够压出条带来。求问做过的大神，这是怎么回事。上清里面的蛋白我是用的默克密理博的富集蛋白的柱子将上清浓缩之后再跑的WB。请做过的大神帮忙看看呐！ @gyesang
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1楼 2016-11-02 15:03:00
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靥靥

新虫 (初入文坛)
请问你跑出来了吗？我也跑不出来

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2楼2018-05-20 23:32:16
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浩月ads

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能是抗体的原因，用多克隆抗体好些。模型成果的话，上清里可以检测到IL-1b和p20，细胞里很难检测到。培养基最好无血清的opti-mem，浓缩上清的方法可以参考TCA丙酮方法浓缩的。
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3楼2019-06-14 13:26:54
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风尘仆仆orz

新虫 (小有名气)
你看看是不是支原体污染了

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4楼2019-11-04 11:52:00
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