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黄亚杰2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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XL_Yang: 金币+50, ★★★很有帮助 2017-02-05 13:02:18
单抗制备的方法有很多,根据单抗的来源不同;鼠源的,人源化的,全人源的。
每种抗体的制备技术也不一样,个人看来,鼠源的抗体最容易,成本低,上手快,前提是有抗原,然后免疫耗子,继而杀掉取脾细胞融合,筛选,检测,然后就是一亚,二亚,三亚一直亚到你满意为止,当然挑克隆还有其他方法。这种方法在生命科学实验指南系列中的抗体制备与使用实验指南介绍的比较详细。
至于人源化的也分为是CDR移植,SDR移植还是特异性决定残基移植,一般来说后两种方法复杂,要求条件高,互补决定区的移植更常见一些,但个人感觉最后得到的抗体其实并不会太理想,当然了比鼠源性的在副作用方面好多了,至于疗效就另说了,额,我说的都是药用的单抗啊,至于体外检测,试剂盒之类的大部分鼠源性抗体足够了,至于书籍的话,我知道也不怎么多,具体操作技巧都是实验室一代传一代的,曹雪涛的免疫学指南里面有一个章节有介绍操作方法还有精编免疫学实验指南也有讲。
至于全人源的根据抗体种类分为Fab,ScFv,Vh,还有全抗体了等等,一般都属于基因范畴的,也就是从别的地方搞来一些样本,然后提RNA,反转录,钓取目的基因然后筛选,展示技术一般也有噬菌体,核糖体,酵母菌,还有真核细胞展示系统,只有真核细胞展示系统可以得到全抗体,经典的当然是噬菌体展示技术,你打开知网搜硕博论文好多都是这种,不过最近真核细胞展示系统也有不少,时代在进步嘛,各种系统都有优缺点,根据自己需要选择。至于书籍,主要涉及的基本操作都是分子生物学方面的,最最最经典的分子克隆实验指南,已经四版了,不过第四版好像没中文版的,第三版绝对够用了,还要提一下流式细胞仪在这中间可是大有用的,有条件可以去捣鼓一下这机器,钱一段在一招聘会上就专管流式的技术员都7000+,可是羡煞我这种还在温饱线上挣扎的人。
个人而言,看一下自己课题需要什么知识,补一下理论知识,然后看一些硕博论文,最后就文献了,至于操作,书上,网上,实验室都可以找找。上面都是讲得到抗体的细胞株,还有细胞培养工艺优化及放大(培养基,培养参数,规模化),纯化工艺优化(三根柱子两块膜)最后就是制剂配方了,估计楼主应该是做细胞株吧,后面就不唠叨了。祝好

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2楼2016-12-13 22:28:01
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3楼2017-02-05 01:42:57
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溪水东流

新虫 (小有名气)

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其实我们做实验的话很多都是,嗯,先看,资料之后把就是这个实验相关的一些资料都看完,然后看明白那个原理操作你写,然后再去做实验了,都是做你的实验,然后去看你一个报名的只是这种话,然后你做单抗的话就应该自己先去多看一下单看这方面的资料啊然后有什么不懂的地方你问你的师哥师姐还有老师,其实他们也都会教你的,然后呢就是网上其实这方面的资源也挺多的,你可以去参考看一下。


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4楼2017-02-05 03:16:40
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