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落叶知秋1

新虫 (初入文坛)

[交流] HA标签western检测 已有4人参与

我有9个不同的片段都连在pAC-V5/his载体，然后在这9个蛋白的N端加了HA标签。将这9个质粒同时转果蝇的S2细胞，收样做western检测HA标签，但是结果只有一个蛋白检测出来了，怎么回事啊，求助求助。。。。
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1楼 2016-10-31 13:46:50
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
说明其他蛋白没有表达。
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2楼2016-10-31 21:02:28
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范文禄
1

发自小木虫Android客户端
3楼2016-11-01 22:36:11
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落叶知秋1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-10-31 21:02:28
说明其他蛋白没有表达。

会不会因为在蛋白前面加了HA标签，蛋白就不容易表达了啊
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4楼2016-11-05 11:38:57
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匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
5楼2016-11-05 15:17:22
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yuy111

银虫 (正式写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-05 22:49:06
Do you mean 9 proteins with HA tag are in different size ? So how big for each of them? If they are too close in size , then western blot (SDS PAGE) needs a higher percent separating gel.
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6楼2016-11-05 22:39:11
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