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remain2018

新虫 (正式写手)

[求助] 细菌鉴定问题已有4人参与

麻烦问一下大家,细菌鉴定中,27F和1504R引物扩增16s rDNA后测序,先只测一个方向大体判断下菌种可以吗?另外,可以直接加LB(不含有抗生素)摇过夜加甘油保菌吗?多谢啦

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liugs

禁虫 (正式写手)

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2楼2016-10-31 09:06:46
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江云儿小郭郭

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以,我们一般是用27f和1492r,先测一个单向的27f,大约有700碱基可以用,结果和克隆的相差不太大

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3楼2016-10-31 14:21:43
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chenxiang29

银虫 (正式写手)

smile to the world
4楼2016-10-31 22:20:43
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌种鉴定好了,我们实现保藏一下,就用试管培养物加甘油,之后用的时候活化
···
5楼2016-11-01 09:01:54
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秋天fall1

新虫 (初入文坛)

在试管培养好以后,用冻存管进行保存,培养液和甘油按照700ul+300ul的比例加入冻存管中,-80度保藏,下次用的时候取一点出来活化就好了

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6楼2016-11-01 14:23:59
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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单端引物测序没有问题,看看而已,可以到哪个属,发文章或者要确定准确的结果,需要两端测通,指出楼上的错误,一般甘油保种,配置30%的甘油灭菌,使用时和菌液等体积混匀,100%的甘油粘度太大,无法彻底灭菌
帮助虫友,提升自己
7楼2016-11-02 16:41:01
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