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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 链霉菌结构转移之后如何验证？
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声线青鸟

新虫 (小有名气)

[交流] 链霉菌结构转移之后如何验证？

各位大神，小妹刚接手链霉菌分子生物。大肠杆菌链霉菌接合转移之后，有菌落出现，请问怎么验证呢？引物已经设计好了，直接菌落PCR 跑胶没有发现我的条带。是不是应该先提质粒，再验证呢？

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1楼 2016-10-28 16:22:07
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shuhua759

捐助贵宾 (著名写手)
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先提基因组做模板，然后做PCR验证

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声线青鸟
2楼2016-10-29 08:16:49
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chinayanfei

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这是阳性菌！壁很厚的！高温不一定会破裂，先提DNA 在PCR

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声线青鸟
3楼2016-10-30 09:34:39
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声线青鸟

新虫 (小有名气)
送红花一朵
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2楼: Originally posted by shuhua759 at 2016-10-29 08:16:49
先提基因组做模板，然后做PCR验证

有一个问题，怎样将平板上长成单菌落的转化子接种到液体培养基中进行扩培呢？液体培养基是YMME 还是TSB呢？

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4楼2016-10-31 09:11:49
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声线青鸟

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-30 09:34:39
这是阳性菌！壁很厚的！高温不一定会破裂，先提DNA 在PCR

有一个问题，怎样将平板上长成单菌落的转化子接种到液体培养基中进行扩培呢？液体培养基是YMME 还是TSB呢？

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5楼2016-10-31 09:12:00
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chinayanfei

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
哪个培养基养就可以了～这个问题没多少问题

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6楼2016-10-31 11:38:13
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声线青鸟

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-31 11:38:13
哪个培养基养就可以了～这个问题没多少问题

只挑到菌落能养起来么？

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7楼2016-10-31 11:48:02
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声线青鸟

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-31 11:38:13
哪个培养基养就可以了～这个问题没多少问题

只挑单菌落能养起来么？

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8楼2016-10-31 11:50:20
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chinayanfei

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 声线青鸟 at 2016-10-31 11:50:20
只挑单菌落能养起来么？
...

是的

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9楼2016-10-31 20:34:17
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声线青鸟

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-31 20:34:17
是的
...

我用YMME培养基培养，单菌落不能生长

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10楼2016-11-01 11:02:40
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