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声线青鸟

新虫 (小有名气)

[交流] 链霉菌结构转移之后如何验证?

各位大神,小妹刚接手链霉菌分子生物。大肠杆菌链霉菌接合转移之后,有菌落出现,请问怎么验证呢?引物已经设计好了,直接菌落PCR 跑胶没有发现我的条带。是不是应该先提质粒,再验证呢?

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shuhua759

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先提基因组做模板,然后做PCR验证

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2楼2016-10-29 08:16:49
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chinayanfei

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这是阳性菌!壁很厚的!高温不一定会破裂,先提DNA 在PCR

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3楼2016-10-30 09:34:39
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声线青鸟

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by shuhua759 at 2016-10-29 08:16:49
先提基因组做模板,然后做PCR验证

有一个问题,怎样将平板上长成单菌落的转化子接种到液体培养基中进行扩培呢?液体培养基是YMME 还是TSB呢?

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4楼2016-10-31 09:11:49
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声线青鸟

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-30 09:34:39
这是阳性菌!壁很厚的!高温不一定会破裂,先提DNA 在PCR

有一个问题,怎样将平板上长成单菌落的转化子接种到液体培养基中进行扩培呢?液体培养基是YMME 还是TSB呢?

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5楼2016-10-31 09:12:00
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chinayanfei

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哪个培养基养就可以了~这个问题没多少问题

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6楼2016-10-31 11:38:13
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声线青鸟

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-31 11:38:13
哪个培养基养就可以了~这个问题没多少问题

只挑到菌落能养起来么?

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7楼2016-10-31 11:48:02
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声线青鸟

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-31 11:38:13
哪个培养基养就可以了~这个问题没多少问题

只挑单菌落能养起来么?

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8楼2016-10-31 11:50:20
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chinayanfei

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 声线青鸟 at 2016-10-31 11:50:20
只挑单菌落能养起来么?
...

是的

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9楼2016-10-31 20:34:17
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声线青鸟

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-10-31 20:34:17
是的
...

我用YMME培养基培养,单菌落不能生长

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10楼2016-11-01 11:02:40
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