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xinxin8739新虫 (正式写手)
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[求助]
关于人igG的ELISA测试
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大家好,因为跨学科,所以我有些关于人igG的ELISA测试不太懂的地方,想请教下各位。 我是想构建双抗体夹心免疫测定人igG的电化学免疫传感器。我把human igG(higG)作为抗原,另外需要再购买两种抗higG的抗体。我不知道该如何选择,才能保证针对的higG的表位不同。 (1)如果用不同种属的,是不是就一定能保证表位不同呢? (2)该如何购买相应的两边的抗体?我的一抗和二抗都要求是unconjugated。如果是试剂盒,抗体都是已经标记好的,有的一抗已经被包被上去了。我需要标记上自己的标记物,因此就没法用。而且试剂盒中,往往都不会告诉你用的一抗 二抗是什么种属的,专属性是怎样,我怎样才能买到配套的呢? (3)关于人igG,如果把它作为抗体来看,是不是包含针对不同病毒抗原的igG,它们的vH,vL不同,其他部位都相同,是吗?就是说我买来的higG protein实际上是针对不同抗原的igG? (4) 那样,我买的anti-higG也只可能是针对higG的FC区具有特异性,才可以测全? (5)有的文献里我也看到了(Fab-specific anti-higG),那这个表述是指代它的抗体是针对higG的Fab区吗?higG那个区不是可变的吗?怎么测全啊 (6)我也看到有的介绍里提到,间接法测试higG,用抗原包被板子,然后加入血清或标样,然后加入酶标结合物。我想问问间接法测试出的higG是不是就同我要做的双抗体夹心不同,它只是针对一种higG,我是针对所有的higG呢。 上述问题困扰我很久了,我知道自己知识欠缺太多,如果有老师同学能够解惑,会非常感激。 |
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