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Lee_log

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱柱堵柱了,求大舅… 已有2人参与

反相柱做番茄红素测定,流动相甲醇:二氯甲烷=3:1,番茄红素加了BHT用二氯甲烷溶。之前做过,流动相没问题,二氯甲烷也可以溶。现误将番茄红素浓度配大了,应该有10倍吧,进样后压力逐渐升高了。然后堵柱了,甲醇洗完比平常还要多10bar。如果这个流动相能跑番茄红素的话,为什么压力会越来越高,流动相对番茄红素的溶解度是没纯二氯甲烷好,但堵了不应该也是越洗越低的吗?可以用逐步提高二氯甲烷配比的流动相来冲洗柱子吗?还是应该用甲醇长时间冲洗?求高玩打救,深表感激。
ps:番茄红素弱极性

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organicsuper

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Lee_log(费姚永芬代发): 金币+10, 谢谢交流 2016-11-25 09:58:31
试着把柱子倒过来冲洗看看,洗完如果压强降了,再以正确流向平衡柱子.如果反冲后还是一样,哪只能报废了.
2楼2016-10-28 14:37:54
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xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

现在反相能用甲醇跟二氯甲烷了么?
刻意去找的东西,往往是找不到的。天下万物的来和去,都有他的时间。
3楼2016-10-28 15:06:42
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Lee_log

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoxiazizx at 2016-10-28 15:06:42
现在反相能用甲醇跟二氯甲烷了么?

额…您好。那个是有什么问题吗?液相条件是文献查到的,之前也做过,是有不对吗?

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4楼2016-10-28 16:51:14
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Lee_log

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by organicsuper at 2016-10-28 14:37:54
试着把柱子倒过来冲洗看看,洗完如果压强降了,再以正确流向平衡柱子.如果反冲后还是一样,哪只能报废了.

您好,请问您觉得用什么溶剂冲会比较合适呢?

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5楼2016-10-28 16:52:34
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

是不是溶剂过滤器脏了,换一个看看?
6楼2016-10-29 11:21:06
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bolic

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
Lee_log(费姚永芬代发): 金币+10, 谢谢交流 2016-11-25 09:58:52
你上了多大浓度啊,连二氯甲烷都洗不下来。。。反相用非水分析时如果压力上升,可以用水洗一洗试试。

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7楼2016-10-31 07:18:48
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Lee_log

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by bolic at 2016-10-31 07:18:48
你上了多大浓度啊,连二氯甲烷都洗不下来。。。反相用非水分析时如果压力上升,可以用水洗一洗试试。

以前做的时候峰面积是k吧,现在一发是7w了…实际上是多少我也不知道了。二氯甲烷的弱极性所以还没敢用纯的来洗柱子。查到一些资料说,可以混甲醇:氯仿=99:1洗,也可以用甲醇再用乙酸乙酯洗,不行再上二氯甲烷这样

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8楼2016-10-31 15:46:31
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827642046

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
Lee_log(费姚永芬代发): 金币+10, 谢谢交流 2016-11-25 09:59:18
请问你用的反相色谱柱吗,真的可以用二氯甲烷,乙酸乙酯来做流动相了吗

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2016-11-01 09:33:03
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Lee_log

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 827642046 at 2016-11-01 09:33:03
请问你用的反相色谱柱吗,真的可以用二氯甲烷,乙酸乙酯来做流动相了吗

我为我的无知道歉。色谱条件是从文献上查阅的,至于堵了,甲醇冲洗无果后打算用的一些低极性溶剂冲柱子,也只是百度了一些资料,查到的也不乏争议。因为不确定,不敢这么做,所以才到论坛寻问,无意冒犯

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10楼2016-11-02 14:46:59
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