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开心365

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小,跪求大神帮助 已有1人参与

本人前些日子用HPLC分离纯化了一些蛋白样品,银染和WB都没有问题,均可以出来条带,但是打质谱的时候结果哦发现在我的蛋白大小的峰值处数值特别小,而
其他的杂峰却峰值很高(见下图 图1左为银染 右为WB 图2位质谱结果),求问各路大神,有没有遇到相似情况的?是不是我的蛋白经过了某种修饰蛋白变小了?还是我纯化的时候接样时接的时间太晚,导致目的蛋白浓度太低,杂蛋白浓度很高?


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液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小,跪求大神帮助
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液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小,跪求大神帮助-1
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life science, that's interesting!
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你是不是可以考虑一下你的蛋白容易降解呢?
2楼2016-10-31 17:00:35
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开心365

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2016-10-31 17:00:35
你是不是可以考虑一下你的蛋白容易降解呢?

嗯也有这个可能 但是我第二次打质谱是新溶解的,结果跟上图一样

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3楼2016-11-01 19:27:12
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 开心365 at 2016-11-01 19:27:12
嗯也有这个可能 但是我第二次打质谱是新溶解的,结果跟上图一样
...

这个就说不好了,你电泳结果来看确实不少,也不会是你没接到啊!新溶解,还是新纯化的?要是你之前纯化收集的样品本身已经不行了,重新溶解也是照样。可以重新电泳看看,才好排除是不是已经降解的可能。
4楼2016-11-02 16:16:00
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开心365

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2016-11-02 16:16:00
这个就说不好了,你电泳结果来看确实不少,也不会是你没接到啊!新溶解,还是新纯化的?要是你之前纯化收集的样品本身已经不行了,重新溶解也是照样。可以重新电泳看看,才好排除是不是已经降解的可能。...

嗯嗯 好的 谢谢啦

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5楼2016-11-02 17:56:00
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