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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小，跪求大神帮助
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开心365

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小，跪求大神帮助 已有1人参与

本人前些日子用HPLC分离纯化了一些蛋白样品，银染和WB都没有问题，均可以出来条带，但是打质谱的时候结果哦发现在我的蛋白大小的峰值处数值特别小，而
其他的杂峰却峰值很高（见下图 图1左为银染 右为WB 图2位质谱结果），求问各路大神，有没有遇到相似情况的？是不是我的蛋白经过了某种修饰蛋白变小了？还是我纯化的时候接样时接的时间太晚，导致目的蛋白浓度太低，杂蛋白浓度很高？


图片1.jpg



图片2.jpg

液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小，跪求大神帮助
图1.jpg


液相色谱分离纯化蛋白质谱结果偏小，跪求大神帮助-1
图2.jpg
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life science, that's interesting!
1楼 2016-10-27 11:42:36
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你是不是可以考虑一下你的蛋白容易降解呢？
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2楼2016-10-31 17:00:35
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开心365

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2016-10-31 17:00:35
你是不是可以考虑一下你的蛋白容易降解呢？

嗯也有这个可能 但是我第二次打质谱是新溶解的，结果跟上图一样

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life science, that's interesting!
3楼2016-11-01 19:27:12
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 开心365 at 2016-11-01 19:27:12
嗯也有这个可能 但是我第二次打质谱是新溶解的，结果跟上图一样
...

这个就说不好了，你电泳结果来看确实不少，也不会是你没接到啊！新溶解，还是新纯化的？要是你之前纯化收集的样品本身已经不行了，重新溶解也是照样。可以重新电泳看看，才好排除是不是已经降解的可能。
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4楼2016-11-02 16:16:00
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开心365

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yxncas-2012 at 2016-11-02 16:16:00
这个就说不好了，你电泳结果来看确实不少，也不会是你没接到啊！新溶解，还是新纯化的？要是你之前纯化收集的样品本身已经不行了，重新溶解也是照样。可以重新电泳看看，才好排除是不是已经降解的可能。...

嗯嗯 好的 谢谢啦

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life science, that's interesting!
5楼2016-11-02 17:56:00
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