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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 崩溃！商品油的DNA，我们是否有缘相见……
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)

[求助] 崩溃！商品油的DNA，我们是否有缘相见…… 已有2人参与

使用了各种方法后，我真的无能为力了，买了个油类提取试剂盒也没有把DNA提出来，我要崩溃了……我需要做过同样的试验的人的帮助……

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1楼 2016-10-26 15:37:18
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huay13

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我就在做油基因提取，试剂盒提取没有用的，必须用手抽。
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食品是个坑
2楼2016-11-07 11:41:39
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huay13

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以参考，茶籽油 DNA 提取方法的比较，核酸提取就是裂解和纯化，裂解我尝试了sds貌似比catb好点吧，可能除蛋白更完全，油里面基因组全部断裂了，无所谓剧烈不剧烈了。用PCI抽，我是直接把水相和沉淀一起抽，重复4次吧，完全澄清水相，后续就是沉淀了，乙醇沉淀或者过柱子，过柱子推荐用qiagen的removal试剂盒，可以最小过45bp的片段，我跑过食用油的DNA片段，基本都是50bp，所以thermoFisher，天跟，axygen的柱子就不推荐使用，损失太大。乙醇沉淀得率会高，纯度就看手法了。大致思路就这样了，提取方法都是差不多了，细节很关键。
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食品是个坑
3楼2016-11-07 13:21:26
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sungel

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

sds貌似比catb好点？不太可能，可以加点ＰＶＰ试试吧，ＣＴＡＢ理论上会更温和
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4楼2016-11-07 17:28:39
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by huay13 at 2016-11-07 13:21:26
可以参考，茶籽油 DNA 提取方法的比较，核酸提取就是裂解和纯化，裂解我尝试了sds貌似比catb好点吧，可能除蛋白更完全，油里面基因组全部断裂了，无所谓剧烈不剧烈了。用PCI抽，我是直接把水相和沉淀一起抽，重复4次 ...

嗯，谢谢，不过可以不过柱子吗？

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5楼2016-11-08 11:36:17
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sungel at 2016-11-07 17:28:39
sds貌似比catb好点？不太可能，可以加点ＰＶＰ试试吧，ＣＴＡＢ理论上会更温和

PVP不是防氧化的吗？

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6楼2016-11-08 11:36:56
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)
建议，提多管，合并后，再浓缩

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7楼2016-11-08 14:02:19
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by choujiaoqi at 2016-11-08 14:02:19
建议，提多管，合并后，再浓缩

我想过浓缩，但是最好的方法就是旋转冻干，因为片段太小了容易飘出……所以现在就想怎么富集

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8楼2016-11-08 16:22:52
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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)
可以试试，醋酸盐浓缩。

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9楼2016-11-08 16:28:00
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by choujiaoqi at 2016-11-08 16:28:00
可以试试，醋酸盐浓缩。

有依据吗？为什么用醋酸盐呢

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10楼2016-11-09 09:23:19
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