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荒唐的硬币金虫 (小有名气)
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[求助]
RT-PCR得不到完整的cDNA扩增产物
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情况是这样的，我目前在从mRNA扩增自己的目的基因（2.2K）。mRNA分别来自叶片和花芽。 最开始，用Oligo（dT）+Random引物做了反转录，之后用一对引物扩增cDNA，拿基因组DNA做阳性对照，上游引物在5‘端，下游引物在3’端，琼脂糖电泳，结果阳性对照有目的条带，我的cDNA都没有结果。 后来，设计了两对引物打算分两段扩增cDNA，琼脂糖电泳，结果对于两对引物，阳性对照有目的条带。而我的cDNA，只有后半段（靠近3‘端）有目的条带，前半段（靠近5’端）始终扩增不出来。 求助大神，有没有可能mRNA前半段并不存在？或者说反转录并没有得到完整的cDNA？ |
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