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金虫 (小有名气)

[求助] miRNA转染，谢谢大家帮助~ 已有1人参与

1、做miRNA转染时，非特异性序列NC组，非特异性序列怎么获得，我是转染骨关节炎的软骨细胞
2、miRNA设计引物只能用成熟序列么，主要miRbase网址打不开，能用NCBI的前体序列设计引物么？怎么设计？
谢谢各位~

我可以哭泣，可以悲伤，但我不可以不坚强。

1楼 2016-10-24 08:57:54

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新虫 (初入文坛)

软骨细胞miRNA转染我之前做实验的时候用的是RFect小核酸转染试剂，操作很方便，不用特意添加或更换培养液。转染效率也挺高的。

2楼2018-10-15 17:16:38

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新虫 (小有名气)

miRNA 转染不一定非要用成熟的序列做设计引物的，转染软骨细胞酶酶转染过，但是有用RFECT转染过A549（人肺癌细胞），效果上还可以，基因敲除效率相对较高。

3楼2019-03-08 15:12:21

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铁虫 (小有名气)

软骨细胞是挺特殊的一种细胞，它既能合成基质，也表达降解酶类。甚至还参与炎症反应。它的增殖和分化程度与其功能紧密相关，基因调控也比较复杂，转染软骨细胞也不是那么容易的，用biodai瞬时转染效果也是不错的，对细胞毒性是低的。

4楼2019-12-25 11:52:43

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