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吉部落zy

金虫 (小有名气)

[求助] miRNA转染,谢谢大家帮助~ 已有1人参与

1、做miRNA转染时,非特异性序列NC组,非特异性序列怎么获得,我是转染骨关节炎的软骨细胞
2、miRNA设计引物只能用成熟序列么,主要miRbase网址打不开,能用NCBI的前体序列设计引物么?怎么设计?
谢谢各位~
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我可以哭泣,可以悲伤,但我不可以不坚强。
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lcree

新虫 (初入文坛)

软骨细胞miRNA转染我之前做实验的时候用的是RFect小核酸转染试剂,操作很方便,不用特意添加或更换培养液。转染效率也挺高的。
2楼2018-10-15 17:16:38
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

miRNA 转染不一定非要用成熟的序列做设计引物的,转染软骨细胞酶酶转染过,但是有用RFECT转染过A549(人肺癌细胞),效果上还可以,基因敲除效率相对较高。
3楼2019-03-08 15:12:21
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

软骨细胞是挺特殊的一种细胞,它既能合成基质,也表达降解酶类。甚至还参与炎症反应。它的增殖和分化程度与其功能紧密相关,基因调控也比较复杂,转染软骨细胞也不是那么容易的,用biodai瞬时转染效果也是不错的,对细胞毒性是低的。
4楼2019-12-25 11:52:43
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