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z妲妲

新虫 (小有名气)

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专业: 细胞生物学研究中的新方法

[交流] 培养细胞污染的检测及排除已有1人参与

细胞培养技术问题十分重要，一旦发生污染，将导致前功尽弃。所以细胞培养一定要建立无菌观念。遇到培养污染要分析原因，及时处理。

凡混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染

细胞污染不能完全被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性

细胞污染的分类

物理污染

化学污染

生物污染（支原体污染）

控制污染

掌握良好的无菌操作技术

建立细胞库

合理应用抗生素

保持工作区清洁

建立良好的规章制度

检测细胞污染

一、污染途径

空气：每立方米含菌数不应超过1－5个

器材：

操作：

血清：

组织样本：

二、对细胞的影响

生长缓慢，分裂相减少，细胞变粗糙，轮廓增强，胞浆多颗粒状物。重者细胞增殖停止，分裂相消失，胞质中出现大量堆积物，细胞变圆或崩解，从瓶壁脱落。

细胞污染的种类和判定

细胞培养中常见的污染物有细菌、酵母菌、真菌、支原体和病毒等。在出现以下情况时培养的细胞可能有污染：

培养液的酸碱度发生异常的改变。

培养液出现混浊。

光镜观察到菌丝和颗粒。

细胞出现死亡或增殖缓慢等。

三、污染物的检测

1. 真菌污染

常见真菌种类：多为烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等

真菌污染判断：

肉眼可见培养液中见白色或黄色漂浮物，

倒置镜下见细胞间纵横交错，丝状、管状、树枝悬浮飘荡的菌丝或形态呈卵形，散在细胞周边和细胞之间生长，

培养液多不混浊。

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