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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC波长设置
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wit2009

木虫 (著名写手)

[求助] HPLC波长设置 已有2人参与

如图：wavelength 和 Reference wavelength 分别代表什么意思，之前一直用紫外检测器，只需设置一个波长即可，现在这个PDA的，怎么设置
还有Bandwidth 和Channel有什么用，有大神能把这图上的解释下吗

HPLC波长设置
1.png
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1楼 2016-10-21 11:16:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

superyeast

专家顾问 (职业作家)
bandwidth指紫外光的波长范围，一般4-16纳米。小些干扰少，但灵敏度低。channel指检测波长。按你的图看你可以设置两个波长。我一般设一个215纳米，一个254纳米。如果你经常走长的序列，可以把底下的“lamp off after run”留着。如果经常走单个样品，建议不要选。紫外灯不喜欢整天开来关去。一般个把小时以内会再用的话就不要关了。

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2楼2016-10-21 14:18:18
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wit2009(费姚永芬代发): 金币+15, 辛苦了 2016-11-08 13:38:09
引用回帖:
6楼: Originally posted by wit2009 at 2016-10-21 03:06:15
channel一个设215纳米，一个254纳米，请问这是什么原则，是通用的吗...

大多数有双键或羰基的化合物在215都多多少少有一些吸收，算是比较通用的波长。但噪音和基线漂移比较大。254是芳环，共轭双键一类才有吸收，会比较“干净”一些。

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9楼2016-10-21 21:19:14
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
reference指参考波长，按图上是把360纳米作为强度参照。如果你可能接触带色样品建议不要选，否则可能出负峰。

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3楼2016-10-21 14:21:14
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远与近

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Reference wavelength：参比波长
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  • 附件 1 : 吸收波长与参比波长.pdf
    • 2016-10-21 14:50:58, 194.88 K
4楼2016-10-21 14:51:19
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
不要套用。这个设置的本意是一般化合物在那里没有吸收。拿那个波长做参比可以矫正一些环境因素的影响，让基线更平稳。

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8楼2016-10-21 21:13:40
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wit2009

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by superyeast at 2016-10-21 21:19:14
大多数有双键或羰基的化合物在215都多多少少有一些吸收，算是比较通用的波长。但噪音和基线漂移比较大。254是芳环，共轭双键一类才有吸收，会比较“干净”一些。
...

现在要测试三个物质，文献上是先衍生化后，再进HPLC，用紫外检测器，360nm波长下测的，那么我设置的channel一个用360，另外一个用多少合适，
Reference wavelength我选择了200nm,bandwidth设置20，其他都是默认值
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10楼2016-10-24 22:59:46
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
reference 坚决不能用200，否则你的谱图会很热闹。可以选择关闭或保留缺省值360/80

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11楼2016-10-25 06:15:09
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普通回帖

听你Re

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by wit2009 at 2016-10-21 11:16:44
如图：wavelength 和 Reference wavelength 分别代表什么意思，之前一直用紫外检测器，只需设置一个波长即可，现在这个PDA的，怎么设置
还有Bandwidth 和Channel有什么用，有大神能把这图上的解释下吗

1.png...

波长，检测波长

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5楼2016-10-21 15:03:33
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wit2009

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2016-10-21 14:18:18
bandwidth指紫外光的波长范围，一般4-16纳米。小些干扰少，但灵敏度低。channel指检测波长。按你的图看你可以设置两个波长。我一般设一个215纳米，一个254纳米。如果你经常走长的序列，可以把底下的“lamp off afte ...

channel一个设215纳米，一个254纳米，请问这是什么原则，是通用的吗
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6楼2016-10-21 19:06:15
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wit2009

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by superyeast at 2016-10-21 14:21:14
reference指参考波长，按图上是把360纳米作为强度参照。如果你可能接触带色样品建议不要选，否则可能出负峰。

reference参考波长，我可不可以用GC-MS的参考离子来理解，这个波长对应特征离子，参考波长对应参考离子，Bandwidth 对应峰宽度
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7楼2016-10-21 19:11:14
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