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霍烨zz

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞系研究目的基因功能

我想用细胞系研究特定基因的功能,之前看文献接受到的思路是,超表达或是iRNA干扰
可是,超表达好像需要用体积比较大的卵母细胞才会比较好操作?(不是很清楚,看文献中用的比较多的是非洲爪蟾卵母细胞......)
iRNA干扰之前同门做过,好像有些转染效率会不太好,最终的干扰效果也会受到影响
PS:还想请教一下,关于干扰效果,看目的基因的mRNA表达水平就可以了,还是需要看目的基因蛋白的表达水平?按我自己的理解,蛋白才是最终发挥功能的载体,应该是蛋白的水平下降了,才能更好地确定目的基因的功能。
突然又联想到最近几年很火的CRISPR/Cas9,不知道能不能利用这个技术建立目的基因缺失的稳定细胞系,从而更好地研究该基因的功能?难度大不大?
纯小白,如有理解错误的地方,还请各位虫子多多指教!!
谢谢大家!
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兔小白

铁虫 (正式写手)

同做,请问有文献吗,给借鉴借鉴呗

发自小木虫Android客户端
2楼2016-10-19 16:55:08
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兔小白

铁虫 (正式写手)

3楼2016-10-19 16:55:40
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霍烨zz

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 兔小白 at 2016-10-19 16:55:08
同做,请问有文献吗,给借鉴借鉴呗

没有啊......
以前看到的都是一些超表达或是RNA干扰的文献
论坛里搜索了一下,感觉理论上应该是可行的,但估计做起来有点难度
4楼2016-10-20 14:52:19
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