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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 新手，不咋懂条带好坏，试剂盒提重组质粒，三条带，中间最亮，可以吗
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方天翼614

新虫 (小有名气)

[交流] 新手，不咋懂条带好坏，试剂盒提重组质粒，三条带，中间最亮，可以吗 已有11人参与

新手，不咋懂条带好坏，试剂盒提重组质粒，三条带，中间最亮，可以吗

新手，不咋懂条带好坏，试剂盒提重组质粒，三条带，中间最亮，可以吗
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1楼 2016-10-18 11:45:42
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010308Jing

木虫 (正式写手)
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-18 18:06:59
可以啊，质粒是会跑出三条带的，线性、环状、超螺旋三种，具体百度一下就知道

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2楼2016-10-18 11:49:17
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找不到自己

银虫 (小有名气)
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-18 18:07:12
引用回帖:
3楼: Originally posted by 方天翼614 at 2016-10-18 14:25:33
谢谢啊    那麻烦问一下，为什么提取的重组质粒有的直接跑电泳    而有的还需要双酶切啊    者都有啥目的呀？我都有点糊涂了    百度给的都只是电泳图谱解释      我的没有经过酶切    那最亮的是线性的吗，是不是 ...

要是没有酶切的，从上面数第三条多一些比较好，就是超螺旋质粒多比较好，如果没有酶切的话，线性太多就不太好
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4楼2016-10-18 14:41:51
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010308Jing

木虫 (正式写手)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:47:14
内容已删除
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5楼2016-10-18 15:04:54
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huhao0230

金虫 (初入文坛)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:49:24
质粒抽提有3种形态，线性、开环、超螺旋。跑胶后超螺旋最快，其次线性，最慢开环。
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6楼2016-10-19 11:07:19
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luckydog52

木虫 (著名写手)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:47:21
引用回帖:
2楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-10-18 11:49:17
可以啊，质粒是会跑出三条带的，线性、环状、超螺旋三种，具体百度一下就知道

前两种是复制中间体和开环吧

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自信源于一次次成功的积累
8楼2016-10-19 15:21:02
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ken19860823

木虫 (正式写手)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:47:28
引用回帖:
9楼: Originally posted by luckydog52 at 2016-10-19 15:23:03
不酶切哪儿来的线性？

碱裂解法提取的质粒基本上都有断裂，质量好坏就看最下面那条带亮度了。

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做基因修饰的老菜鸡
10楼2016-10-19 16:19:39
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learner_zyj

新虫 (小有名气)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:49:12
引用回帖:
8楼: Originally posted by luckydog52 at 2016-10-19 15:21:02
前两种是复制中间体和开环吧
...

这个问题貌似还没有确定答案，可能是影响小没人追究这个吧。

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12楼2016-10-19 16:52:42
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普通回帖

方天翼614

新虫 (小有名气)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:49:18
引用回帖:
2楼: Originally posted by 010308Jing at 2016-10-18 11:49:17
可以啊，质粒是会跑出三条带的，线性、环状、超螺旋三种，具体百度一下就知道

谢谢啊    那麻烦问一下，为什么提取的重组质粒有的直接跑电泳    而有的还需要双酶切啊    者都有啥目的呀？我都有点糊涂了    百度给的都只是电泳图谱解释      我的没有经过酶切    那最亮的是线性的吗，是不是提取的质粒失败了 ，
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3楼2016-10-18 14:25:33
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wallee

新虫 (初入文坛)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:49:29
重组质粒？你跑的图是前段连载体吗？

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7楼2016-10-19 12:25:43
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luckydog52

木虫 (著名写手)
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-20 09:49:35
不酶切哪儿来的线性？

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自信源于一次次成功的积累
9楼2016-10-19 15:23:03
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