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风信子12345

木虫 (正式写手)

[求助] 安捷伦 1260 DAD 梯度洗脱 空白(乙腈)波动大 已有3人参与

0-6min 100%流动相A(乙腈:水:磷酸=5:95:0.1)到100%流动相B(乙腈:水:磷酸=95:5:0.1)  然后流动相B再保持4min 流速2.5,检测波长205nm,结果如下图,求助各位大神,谢谢!

安捷伦 1260 DAD 梯度洗脱 空白(乙腈)波动大


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xieyueting

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
西湖醉鱼: 金币+2, 欢迎常来分析版 2016-10-13 16:19:41
风信子12345(费姚永芬代发): 金币+20 2016-11-24 12:04:56
首先,做梯度前,必须先冲洗干净管路,建议先接二通,冲冲柱水,再冲异丙醇,把管路冲干净了才好判断你的样品峰。然后,你的流动相比例短时间跨度有点大,容易造成基线漂移。况且,205的波长,本身就受末端吸收的影响!不知道楼主是做有关物质还是其他,建议放缓一点

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8楼2016-10-12 21:25:53
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shi102241218

木虫 (著名写手)

这个应该算是正常,需要调节流动相组成
2楼2016-10-12 16:26:18
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
风信子12345(费姚永芬代发): 金币+5, 谢谢交流 2016-12-07 13:08:32
你是接下来所有的峰都这样还是就这一针这样?如果就这一针感觉柱子没平衡好,要是每针都这样有可能是管路里面进气跑了,Purge阀打开purge一段时间再进样试试。
4楼2016-10-12 16:49:59
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风信子12345

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by llw1986 at 2016-10-12 16:49:59
你是接下来所有的峰都这样还是就这一针这样?如果就这一针感觉柱子没平衡好,要是每针都这样有可能是管路里面进气跑了,Purge阀打开purge一段时间再进样试试。

空白进过好多次,中间也进过,差不多都是这样子,反而样品在相应的位置波动比空白小。

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5楼2016-10-12 16:58:52
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shi102241218

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
风信子12345(费姚永芬代发): 金币+10 2016-11-24 12:04:43
引用回帖:
3楼: Originally posted by 风信子12345 at 2016-10-12 16:27:20
你是说梯度变化太大了吗?
...

看你这你这梯度程序就是在洗柱子,把磷酸和水配成一相,梯度放缓一点,时间延长再试试吧
7楼2016-10-12 17:16:09
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.0-6min梯度没变化时有这么大的峰,系统应该是被污染了,需要冲洗系统。
2.尝试梯度变化慢一点。
3.205nm的条件下,乙腈的质量很重要,乙腈质量不好很容易出大的杂峰。
10楼2016-10-13 16:16:23
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-lizi

新虫 (正式写手)

末端啊,又是这么大的梯度变化,容易出现基线漂移,我用的也是1260

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11楼2016-10-13 16:58:22
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-lizi

新虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 风信子12345 at 2016-10-13 22:38:03
我把梯度时间延长了,末端波动确实大啊,请问你是怎么解决的啊?谢谢
...

一般用异丙醇,温水,甲醇冲洗,将系统调整到最佳状态,基线会稍微好一点

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14楼2016-10-13 22:39:36
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风信子12345

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shi102241218 at 2016-10-12 16:26:18
这个应该算是正常,需要调节流动相组成

你是说梯度变化太大了吗?

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3楼2016-10-12 16:27:20
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风信子12345

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by llw1986 at 2016-10-12 16:49:59
你是接下来所有的峰都这样还是就这一针这样?如果就这一针感觉柱子没平衡好,要是每针都这样有可能是管路里面进气跑了,Purge阀打开purge一段时间再进样试试。

应该没有气泡,走平衡时基线挺稳的

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6楼2016-10-12 17:05:52
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风信子12345

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xieyueting at 2016-10-12 21:25:53
首先,做梯度前,必须先冲洗干净管路,建议先接二通,冲冲柱水,再冲异丙醇,把管路冲干净了才好判断你的样品峰。然后,你的流动相比例短时间跨度有点大,容易造成基线漂移。况且,205的波长,本身就受末端吸收的影 ...

好的,我试一下,谢谢!

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9楼2016-10-12 23:20:53
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