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请教一下基因家族多个亚族成员构建干涉载体的问题
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我想干涉马铃薯AGO1基因,但是AGO1基因有两个亚族AGO1-1,AGO1-2,这两个基因的同源性比较高,有百分之七十多,但是却没有两百以上的完全同源的区段,全基因比对下来都是最多有二十多个完全同源的一小段,然后一两个碱基不同,再一小段完全同源。我现在想构建一个载体同时把1-1和1-2都干涉掉。我想了两个思路,一个方案是找两个基因最同源的500bp左右的一段来构建干涉载体,希望这一段最后能够同时把两个基因都干涉掉;另一个方案是两个基因分别扩一段300bp左右的片段,然后构建一个双干涉载体,希望能同时把两个基因都干涉掉。 但是我不知道哪个成功率更高一点,所以想请教一下大家。或者有什么更好的方案可以给点建议,谢谢大家! |
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