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杏林湾畔

金虫 (初入文坛)

[求助] 请教购买的冻干菌粉要怎么恢复?谢谢! 已有2人参与

购买了一株副球菌,恢复说明上有说先将菌粉用少量培养基混匀,然后再转移到培养基上复苏。但是疑问是转移到固体培养基上还是液体培养基里。。
     如果是固体培养基,是划线还是推平板?以及,是不是用液体培养基做摇瓶好一些?
     因为菌粉数量有限,感觉只能用一次,所以很担心做错,谢谢各位啦!
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runrain

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-10-17 17:46:52
冻干粉活化是先用灭菌后的培养基溶解,溶解后的冻干粉可以直接接种到平板、斜面或者液体培养基中。如果需要马上使用大量菌体,可以用液体培养基摇床培养复苏。但是如果是活化后保藏,建议直接用平板或者斜面。这样可以减少一代的培养(一般菌种是使用5代以内的,如果超过5代需要重新确认菌种纯度和性能)。当然你也可以液体摇出的菌,马上做成甘油种进行保藏。如果还不放心,可以先平板画线两三个平板或斜面,剩下的则用于液体摇床培养。一般画线1微升的接种量就足够了,摇床10微的接种量也足够,所以不用担心样品不够。一般来说不要用平板涂布,因为菌液浓度高,涂布后平板上长出来就是一大片菌,看不到单菌落。如果是接种平板和斜面,直接画线即可。

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8楼2016-10-13 15:40:50
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江云儿小郭郭

银虫 (正式写手)

加灭好菌的培养基约200um到买的冻干管中,再吸大约50um到固体培养基上,可以不用涂布和划线,直接正置培养,另外的菌液接到其余的固体培养基和液体培养基,建议接至少3个固体平板和两瓶液体

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3楼2016-10-12 14:03:06
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普通回帖

lindench

专家顾问 (文坛精英)

固体平板涂布,可以配的稀一点

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2楼2016-10-12 10:50:39
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江云儿小郭郭

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+3, 有帮助 2016-10-17 17:47:09
接的时候注意无菌操作,以固体平板为主,多考虑几种培养基,可以参考保藏中心提供的培养基和菌种鉴定的文章中的培养基,选择菌的最适条件培养

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4楼2016-10-12 14:05:30
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江云儿小郭郭

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 江云儿小郭郭 at 2016-10-12 14:03:06
加灭好菌的培养基约200um到买的冻干管中,再吸大约50um到固体培养基上,可以不用涂布和划线,直接正置培养,另外的菌液接到其余的固体培养基和液体培养基,建议接至少3个固体平板和两瓶液体
...

200ul

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5楼2016-10-12 14:05:50
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晒太阳的小木

铜虫 (初入文坛)

6楼2016-10-12 14:54:41
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

我最近也想活化一个冻干粉的菌株,楼主打算怎么做啊?我这里只有一罐种子,没有说明书,不知道怎么办
···
7楼2016-10-13 10:30:52
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浅见依恋

铜虫 (小有名气)

之前做过,按照说明做,接到平板上吧,我之前接过一些到斜面上,不好接

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9楼2016-10-15 18:05:00
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kshdd

金虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by runrain at 2016-10-13 15:40:50
冻干粉活化是先用灭菌后的培养基溶解,溶解后的冻干粉可以直接接种到平板、斜面或者液体培养基中。如果需要马上使用大量菌体,可以用液体培养基摇床培养复苏。但是如果是活化后保藏,建议直接用平板或者斜面。这样可 ...

请问为什么5代以内,具体的说说吧

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10楼2016-10-16 08:26:32
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