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DNA提取峰图不正常,260/280比值低,230值负数
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DNA提取峰图不正常,260/280比值低,230值负数
已有7人参与
提取的DNA用one drop测定,峰图不正常,260/280比值低,230值负数,以前没出现过这种情况,请问是哪里出了问题?
IMG_20161010_150917.jpg
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2016-10-10 15:11:18
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7楼
:
Originally posted by
luozie
at 2016-10-12 15:03:47
建议电泳看看,仪器调零时要使用与待测样品相同的溶解液;260是核酸的吸收峰、280是蛋白的吸收峰、230是盐离子的吸收峰;现在你的260是0.216、280是0.177、230是-2.645、核酸浓度10ng/ul;先直接看核酸浓度太低,26 ...
分析的很完全,而且靠谱
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2016-10-12 22:20:12
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2016-10-10 21:42:58
纯度不高,裂解不彻底,可以跑电泳看看,有没有RNA
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2016-10-10 20:52:31
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2016-10-16 22:24:48
原始样本量太少了,导致DNA的浓度太低,就会出现这种情况,没必要重提,PCR、扩基因、定量等都可以用,如果实在对浓度的要求比较高,那就加大样本量,或者多提几管最后过同一个柱子,问题自动消除,以前没出现这种问题,是因为以前你提的DNA浓度就没这么低过,尤其是混合的样品
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2016-10-12 17:41:41
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2016-10-10 21:40:48
蛋白质没有除尽吧。还有RNA等
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2016-10-10 16:23:12
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跑个电泳一目了然了
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2016-10-10 21:50:23
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我最近也在找原因,估计你的是因为蛋白没有除尽,多抽提几次试试
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2016-10-11 14:02:49
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对于去除蛋白,可以用氯仿和甲醇在抽提一下
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10楼
2016-10-12 22:21:03
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