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七星桥缘

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取峰图不正常,260/280比值低,230值负数 已有7人参与

提取的DNA用one drop测定,峰图不正常,260/280比值低,230值负数,以前没出现过这种情况,请问是哪里出了问题?

DNA提取峰图不正常,260/280比值低,230值负数
IMG_20161010_150917.jpg
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匿名

用户注销 (正式写手)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-10-12 22:12:27
本帖仅楼主可见
7楼2016-10-12 15:03:47
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生为人杰

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by luozie at 2016-10-12 15:03:47
建议电泳看看,仪器调零时要使用与待测样品相同的溶解液;260是核酸的吸收峰、280是蛋白的吸收峰、230是盐离子的吸收峰;现在你的260是0.216、280是0.177、230是-2.645、核酸浓度10ng/ul;先直接看核酸浓度太低,26 ...

分析的很完全,而且靠谱

发自小木虫IOS客户端
9楼2016-10-12 22:20:12
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angelayangxi

新虫 (初入文坛)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-10 21:42:58
纯度不高,裂解不彻底,可以跑电泳看看,有没有RNA

发自小木虫Android客户端
3楼2016-10-10 20:52:31
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-10-16 22:24:48
原始样本量太少了,导致DNA的浓度太低,就会出现这种情况,没必要重提,PCR、扩基因、定量等都可以用,如果实在对浓度的要求比较高,那就加大样本量,或者多提几管最后过同一个柱子,问题自动消除,以前没出现这种问题,是因为以前你提的DNA浓度就没这么低过,尤其是混合的样品
8楼2016-10-12 17:41:41
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普通回帖

黄小萌萌

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-10 21:40:48
蛋白质没有除尽吧。还有RNA等
2楼2016-10-10 16:23:12
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queen3511

铜虫 (小有名气)

4楼2016-10-10 21:43:45
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latchkeyboy

铜虫 (小有名气)

笨鸟先飞&早起的鸟儿有虫吃!
5楼2016-10-10 21:50:23
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我最近也在找原因,估计你的是因为蛋白没有除尽,多抽提几次试试
6楼2016-10-11 14:02:49
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生为人杰

新虫 (小有名气)

对于去除蛋白,可以用氯仿和甲醇在抽提一下

发自小木虫IOS客户端
10楼2016-10-12 22:21:03
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