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玉雪晴儿

银虫 (正式写手)

[交流] TOP10,DH5α感受态细胞在Amp培养基中培养出现粉红色杂菌 已有1人参与

这种情况是最近1个月才出现的。
刚开始出现这种情况的时候是在9月中旬,使用的是前辈在今年3月份制备的TOP10感受态细胞进行转化。在转化平板上挑取单克隆菌落进行菌液PCR的时候P不出来条带,于是全部提质粒。提质粒的过程中就发现有些单克隆的菌液特别浓,离心沉淀下来后发现菌体是粉红色的(正常TOP10大肠杆菌菌体的颜色应该是比较淡的米白色),用革兰氏染色发现这种粉红色细菌也是杆状的,呈革兰氏阴性,但是其菌体聚集呈粘稠的网状,明显与正常的TOP10大肠杆菌不同(正常大肠杆菌聚集比较松散),且经过质粒提取步骤,这种粉红色菌体提不出质粒。
刚开始以为是在转化涂布平板的过程中引入的杂菌污染,后面使用新制备的TOP10感受态做转化的时候也出现了这种情况。于是取用于制备感受态的TOP10宿主菌和DH5α宿主菌,以及TOP10感受态细胞和DH5α感受态细胞接入Amp抗性培养基和Kana抗性培养基中培养,结果发现四种细菌在Amp抗性的培养基中均能够生长,而且感受态细胞的生长速度更快,长成的细菌离心沉淀后菌体均呈粉红色,而在Kana培养基中却不能生长。
请问有没有人遇到过类似的情况?知不知道这种污染是怎么造成的?请各位虫友赐教!
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ahahagaga

禁虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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2楼2018-10-27 16:00:31
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