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TOP10,DH5α感受态细胞在Amp培养基中培养出现粉红色杂菌 已有1人参与
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这种情况是最近1个月才出现的。 刚开始出现这种情况的时候是在9月中旬，使用的是前辈在今年3月份制备的TOP10感受态细胞进行转化。在转化平板上挑取单克隆菌落进行菌液PCR的时候P不出来条带，于是全部提质粒。提质粒的过程中就发现有些单克隆的菌液特别浓，离心沉淀下来后发现菌体是粉红色的（正常TOP10大肠杆菌菌体的颜色应该是比较淡的米白色），用革兰氏染色发现这种粉红色细菌也是杆状的，呈革兰氏阴性，但是其菌体聚集呈粘稠的网状，明显与正常的TOP10大肠杆菌不同（正常大肠杆菌聚集比较松散），且经过质粒提取步骤，这种粉红色菌体提不出质粒。 刚开始以为是在转化涂布平板的过程中引入的杂菌污染，后面使用新制备的TOP10感受态做转化的时候也出现了这种情况。于是取用于制备感受态的TOP10宿主菌和DH5α宿主菌，以及TOP10感受态细胞和DH5α感受态细胞接入Amp抗性培养基和Kana抗性培养基中培养，结果发现四种细菌在Amp抗性的培养基中均能够生长，而且感受态细胞的生长速度更快，长成的细菌离心沉淀后菌体均呈粉红色，而在Kana培养基中却不能生长。 请问有没有人遇到过类似的情况？知不知道这种污染是怎么造成的？请各位虫友赐教！  |
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2楼2018-10-27 16:00:31