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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 单菌落PCR出现了2条带是为什么？
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泡泡熊123

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by queen3511 at 2016-10-10 22:07:55
要想图漂亮，那就换对引物。只要结果的话，那就直接去测序，测序正确就没问题啦

恩恩，好的谢了
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11楼2016-10-11 17:28:29
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沐枫之城

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有阳性对照的话做个阳性对照，PCR看结果是怎么样的，如果也是两条带，那说明菌落没有问题，如果阳性对照就一条带，那很有可能是菌落污染了。
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12楼2016-10-11 17:51:00
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独孤一生

新虫 (小有名气)
一：平板长过了；二引物特异性不好；三，操作或试剂污染

发自小木虫IOS客户端
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13楼2016-10-11 17:54:43
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匿名

用户注销 (正式写手)
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14楼2016-10-12 11:52:39
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青苹果QT

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

为什么要用通用引物呢，没有自己设计的特定的引物吗？
有可能是通用引物非特异性结合引起 的。提高一下退火温度，降低引物浓度试试。或者是重新设计引物。
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15楼2016-10-12 13:03:16
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514278815

木虫 (小有名气)
有没有设置阴性对照呢？有时候pcr体系污染也会这样的

发自小木虫Android客户端
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16楼2016-10-12 13:59:06
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、做个温度梯度PCR
2、切胶回收
3、如果是16S的话可以换其他引物
4、祝好
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17楼2016-10-12 17:16:31
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