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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 高效液相色谱显示有紫外区有最大吸收，但是流分做全波段扫描结果是没吸收。
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呼叫鲜橙多

银虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱显示有紫外区有最大吸收，但是流分做全波段扫描结果是没吸收。 已有2人参与

HPLC检测样品显示在200~300nm处有两个最大吸收峰，但是把流分(纯度不高)收集后UV全波段扫描，结果显示基本没有吸收，哪位大神能不能解释下为什么？我是不是应该把收集的流分浓缩一下，加大浓度再全波段扫描？
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1楼 2016-10-08 21:10:18
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

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5楼: Originally posted by 呼叫鲜橙多 at 2016-10-08 22:18:58
那我需要继续多收集流分，然后浓缩，加大浓度吗？这样紫外是不是就会有吸收了？...

理论上是这样。但实际操作起来不容易。有些仪器要相当大的量，没有制备柱的话会让分离变得不切实际。如果有条件可以用DAD直接测紫外吸收，或用VWD做停流扫描。

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6楼2016-10-09 22:36:19
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普通回帖

权劭

新虫 (小有名气)
有没有可能是分流的时候组分分解了

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2楼2016-10-09 08:36:40
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呼叫鲜橙多

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 权劭 at 2016-10-09 08:36:40
有没有可能是分流的时候组分分解了

不太可能吧。分解也是需要外界环境的吧，比如温度啊之类的。我这常温不太可能分解啊。HPLC柱温是30℃，搞不清楚
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3楼2016-10-09 08:40:48
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superyeast

专家顾问 (职业作家)
浓度太低，看不出来

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4楼2016-10-09 13:03:21
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呼叫鲜橙多

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by superyeast at 2016-10-09 13:03:21
浓度太低，看不出来

那我需要继续多收集流分，然后浓缩，加大浓度吗？这样紫外是不是就会有吸收了？
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5楼2016-10-09 14:18:58
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呼叫鲜橙多

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by superyeast at 2016-10-09 22:36:19
理论上是这样。但实际操作起来不容易。有些仪器要相当大的量，没有制备柱的话会让分离变得不切实际。如果有条件可以用DAD直接测紫外吸收，或用VWD做停流扫描。
...

可惜没有你说的那个条件啊，只能多收集流分了，每次可收集的组分很少。看来得下功夫了。
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7楼2016-10-10 08:47:58
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tasche

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 呼叫鲜橙多 at 2016-10-10 08:47:58
可惜没有你说的那个条件啊，只能多收集流分了，每次可收集的组分很少。看来得下功夫了。...

用安捷伦的vwd做个停泵全波长扫描呗

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8楼2016-10-10 12:36:49
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呼叫鲜橙多

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by tasche at 2016-10-10 12:36:49
用安捷伦的vwd做个停泵全波长扫描呗
...

我这边检测器是DAD的，不知道能不能做您说的那个停泵全波长扫描。具体怎么操作也不会。从来没有停泵做过测试的。
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9楼2016-10-10 22:09:44
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queen3511

铜虫 (小有名气)
你的样品成分很复杂吗？直接用样品去做UV全波段扫描不行吗？

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10楼2016-10-10 22:15:52
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