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qiuge

新虫 (著名写手)

[交流] 石蜡切片,切好后展片之前还是完好的,展片后还没脱蜡即破碎 已有4人参与

植物组培苗嫩茎,传统石蜡切片法,FAA固定,酒精脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡、包埋。
前面的步骤都摸索好了,切片能切成完整的蜡带,材料放到水浴锅架上展片之前也还是完好的,能看出一个个细胞的轮廓,但是展片之后,拿下来,还没脱蜡,在显微镜下观察,过上几分钟就开始破碎,变得一团黑色,细胞壁什么的都看不清了。
怎么回事?
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zhen022

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
脱水出问题变脆了吧

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2楼2016-10-07 21:16:04
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还是植物好

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我认为可能是由于切片太厚。其次我建议在镜检时滴几滴二甲苯(避免镜检时破碎,且透明),看看到底有几层细胞,是否是切片的问题。

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还是植物好
3楼2016-10-07 22:20:47
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qiuge

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhen022 at 2016-10-07 21:16:04
脱水出问题变脆了吧

那应该怎么解决?脱水时间需要缩短?
4楼2016-10-08 12:42:05
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qiuge

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhen022 at 2016-10-07 21:16:04
脱水出问题变脆了吧

那应该怎么解决?脱水时间需要缩短?
5楼2016-10-08 12:44:14
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zhen022

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by qiuge at 2016-10-08 12:44:14
那应该怎么解决?脱水时间需要缩短?...

再来一次试试,时间上应该要短一些吧。。。可以查查石蜡贴片组织变脆的帖子看看
6楼2016-10-08 15:06:57
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qiuge

新虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 还是植物好 at 2016-10-07 22:20:47
我认为可能是由于切片太厚。其次我建议在镜检时滴几滴二甲苯(避免镜检时破碎,且透明),看看到底有几层细胞,是否是切片的问题。

镜检时滴几滴二甲苯?你的意思是烘完片之后就滴上,然后观察吗?这样能防止材料破碎?
其他文献里这类材料也都是10um左右,不算特别厚,我的也一样。
7楼2016-10-08 16:09:41
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zhangdekai

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
包埋时蜡温太高?
8楼2016-10-10 00:53:37
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cao-yu

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不是有专门的展片机吗?用水浴锅展片会不会使得蜡片和组织不能很好的粘附到载玻片上。或者你的镜头碰到了载玻片上的蜡片呢?

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常怀感恩之心,方能容己容人!
9楼2016-10-10 19:43:44
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