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质粒的酵母直接转化 已有1人参与
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实验材料 单菌落 试剂、试剂盒 PLATE溶液、载体DNA、转化质粒DNA 仪器、耗材 离心管、离心机 实验步骤 1、 用牙签从平板中挑取单菌落(直径2~3mm),转移到1.5ml的无菌离心管中。 2、 将10μl载体DNA(100μg)与10μl转化质粒DNA混合,振荡均匀。(若转化DNA是用未经RNA酶处理的“mini-prep DNA”方法制得,则不需加载体DNA)。 3、 加0.5ml PLATE溶液,振荡。 4、 置于实验台上,室温培养4天。 5、 置42℃下热激15分钟。 6、 以8000~10000r/min离心10秒沉淀细胞,小心弃去上清液,将细胞轻轻悬浮到200μl无菌蒸馏水,使细胞悬浮均匀,再直接将混合液涂选择平板。 |
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