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yuevis

铜虫 (小有名气)

[交流] 新手求助,pcr成分加入量怎么确定

刚入手分子实验,还请各位解惑,做一般的PCR以及菌落PCR的时候,各个成分的加入量是怎么算的,或者以什么为标准?网上查找的几个由于浓度不同(或者浓度相同),体系不同(或体系相同)各个成分加入单位量也不同。求各位指教。

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周义杰

新虫 (初入文坛)

★ ★
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-07 08:27:25
我也是新手,但是做了几次PCR了。我觉不同的模板和引物,搭配的其他成分也不一样,总之酶用量最少,引物一般比模板少一点,水就是用来加到体系总量的。感觉比较靠经验,要是没有前人经验就自己照着相关文献做个梯度,看看哪个跑的好。

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4楼2016-10-07 00:12:09
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queen3511

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-07 08:27:32
抓住老鼠的就是好猫!只要电泳出来有条带就好了,至于说如果电泳出来没条带,其实体系加量是最其次的原因,一般出入不大,反而是引物和退火温度对结果影响更大。祝好运,加油!

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5楼2016-10-07 04:58:05
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