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so-solo

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于蛋白损伤的问题 已有2人参与

在做一个蛋白的纳米笼
想请教下,如果想证明一蛋白笼被破坏该什么样方法啊?

想过用透射电镜,但是粒径就十几纳米,就算破了应该也看不到吧?
做过电泳,没有出现新的条带,但是条带强度有明显减轻。
还有没有什么更直观的方法证明我的蛋白笼被破坏了啊?
做圆二色谱有用吗?原子力呢?求大神指教啊
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so-solo

铁虫 (初入文坛)

真的没有人回吗
2楼2016-10-06 17:34:58
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so-solo

铁虫 (初入文坛)

自己顶一下
3楼2016-10-06 18:04:40
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haha_bjfu

新虫 (小有名气)

4楼2016-10-07 19:24:10
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

用高梯度的尿素、胍等实现蛋白的变性,然后通过梯度透析,逐步实现蛋白的变性-复性。
5楼2016-10-09 18:56:09
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

百度百科,
蛋白质复性
通常人们用于溶解包涵体肽链的液体是高浓度的变性盐(一般是8M的尿素,或者6M的盐酸胍)。
6楼2016-10-09 18:58:25
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so-solo

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yifeng1206 at 2016-10-09 18:56:09
用高梯度的尿素、胍等实现蛋白的变性,然后通过梯度透析,逐步实现蛋白的变性-复性。

没有看懂
我考察的使活性氧对蛋白的损伤,已经活性氧刺激过,但不知道怎么证明
7楼2016-10-12 11:35:56
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那些花儿243

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by so-solo at 2016-10-12 11:35:56
没有看懂
我考察的使活性氧对蛋白的损伤,已经活性氧刺激过,但不知道怎么证明...

圆二色谱、红外光谱可以试试,还有非变性琼脂糖凝胶电泳,DLS,zeta电位也可以试试
8楼2016-11-03 17:54:03
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那些花儿243

铜虫 (初入文坛)

FPLC也行啊,简单点,如果用三种方法都没什么变化就可以证明啦
9楼2016-11-03 17:59:54
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