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huangwensh

木虫 (著名写手)

[交流] 蛋白表达和酶水平的结果差异大,怎么解释

各位前辈,最近做了一个药的Western bolt 蛋白表达和酶水平的试验,但是IC50值相差很大,怎么解释
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
能够理解为WB检测的是目的酶的表达量,酶水平是只该酶的酶活检测吗,是两个实验的实验结果比较吗?

如果这个理解正确,这种现象是可能存在的,也是正常现象,不同的检测方法会有系统偏差,只能确保结果和药物浓度是有一致性响应趋势,

可能的原因是很多,比如:

WB的检测相对来说精密度差些,测量的结果有偏差

酶活检测的是一个信号放大的过程,当底物浓度不够时,不同浓度下的酶的信号放大效果可能不一样,导致高浓度酶酶活测定的结果进入假平台期,IC测得结果偏小。

不论是什么结果,重复是放在首位的,当几次测量的结果都是这样的趋势时,才会去推测可能的原因,祝好
2楼2016-09-30 23:02:22
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