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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

[求助] 包涵体复性

为什么我的包涵体复性到PBS后,用超滤管浓缩之后,蛋白几乎没有了,比超滤之前浓度还低,是不是复性之后的包涵体不适用于超滤浓缩,原因何在呢?望不吝赐教!PS:超滤管没有漏,超滤后的体积比超滤前体积少得多,超滤前跑过电泳及测过浓度
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

求大神相助啊,国庆放假回家,节后回来有相助,再送你小红花
2楼2016-09-30 14:36:04
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玉砌的强

金虫 (正式写手)

超滤管的大小应为蛋白分子量的三分一左右

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从心开始,从新开始......
3楼2016-10-03 07:25:46
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 玉砌的强 at 2016-10-03 07:25:46
超滤管的大小应为蛋白分子量的三分一左右

蛋白大小为55kd,超滤管为10kd的啊,应该没问题啊
4楼2016-10-08 08:52:33
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玉砌的强

金虫 (正式写手)

我一般用的Millipore的超滤管,用完之后要用0.2M的NaOH处理一下,再用20%乙醇保存。

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从心开始,从新开始......
5楼2016-10-10 07:28:22
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木槿飘扬

新虫 (小有名气)

检测透过去的蛋白浓度,如果你的蛋白确实没在这部分,那就是吸附在膜上了。一般都会吸附一些,但是绝对不会这么严重。所以你还是好好确认一下透过液有没有。因为透过的速度还和你用的转速有关。还有,看看你的蛋白是不是不稳定。

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6楼2016-10-10 08:20:34
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 木槿飘扬 at 2016-10-10 08:20:34
检测透过去的蛋白浓度,如果你的蛋白确实没在这部分,那就是吸附在膜上了。一般都会吸附一些,但是绝对不会这么严重。所以你还是好好确认一下透过液有没有。因为透过的速度还和你用的转速有关。还有,看看你的蛋白是 ...

好的,谢谢
7楼2016-10-10 08:31:24
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wwbqzhj

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 木槿飘扬 at 2016-10-10 08:20:34
检测透过去的蛋白浓度,如果你的蛋白确实没在这部分,那就是吸附在膜上了。一般都会吸附一些,但是绝对不会这么严重。所以你还是好好确认一下透过液有没有。因为透过的速度还和你用的转速有关。还有,看看你的蛋白是 ...

送你
8楼2016-10-10 08:32:54
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