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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 基因组DNA的提取
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 临风7071 的 1 个金币

临风7071

木虫 (正式写手)

[交流] 基因组DNA的提取

本人提了基因组DNA用的是0.6倍体积的异丙醇沉淀的，后来电泳时发现根本就没有DNA，我查了一下，异丙醇是不溶于盐溶液的，是不是这个影响了DNA的沉淀啊？??如果改用DNA等电点沉淀是不是可行的啊？？请高手指教啊！！！！
[search]异丙醇[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-5 at 14:53 ]
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1楼 2008-11-23 14:01:33
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elton_monkey

银虫 (初入文坛)
我们这边抽提基因组用2倍体积乙醇和0.6体积的异丙醇都没有问题，估计应该是先前的步骤出问题了吧。
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2楼2008-11-23 17:07:52
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yufuxian

木虫 (著名写手)
如果沉不出来就用2倍体积的乙醇沉多好啊
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3楼2008-11-23 17:21:38
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
我一直是用预冷的异丙醇进行沉淀的，没有问题，再检查一下其他步骤，其他药品有没有问题
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4楼2008-11-24 22:26:09
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zhanglike

铜虫 (初入文坛)
用异丙醇没有问题啊  我们一直这么做的 并且前面的步骤很粗旷到后面也有DNA出来。 怀疑楼主电泳出问题了
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5楼2008-11-25 08:55:28
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proteinwang

铜虫 (正式写手)
我提谷氨酸棒杆菌的基因组DNA时，感觉提取的效果也很不好，主要感觉好像第一步破坏细胞壁时的溶菌酶效果溶菌效果不好！相同的溶菌酶浓度提取其它革兰氏阳性细菌的效果没有问题，也不知是什么原因。
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6楼2008-11-25 10:06:19
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)
可以试一下溶葡萄球菌素(lysostaphin), 不过很贵的；或石英砂，超声波。
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7楼2008-11-25 13:33:24
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胡一胡

金虫 (小有名气)
估计是之前的步骤 出现了问题！！
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8楼2008-11-25 17:16:14
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
临风7071(金币+1,VIP+0):可能就是这个原因了
异丙醇根本就没有必要用冷的 , 可能裂解出问题了.要不就是后续抽提的时候吸到有机相了.我就干过后面的事情.主要是体系太小了,舍不得扔,结果芝麻没捡到,西瓜也丢了
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
9楼2008-11-25 18:29:57
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xuhf123456

银虫 (初入文坛)
可能是裂解的问题
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10楼2008-11-25 20:53:51
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