| 查看: 580 | 回复: 8 | |||
fzhrobin木虫 (正式写手)
|
[交流]
请教
|
|
本人在实验中遇到了个问题，请教下各位专家： 植物蛋白已经用TCA/丙酮法提取到了。下面要进行酶解，酶解之后上质谱。参考别人的文献，在酶解前在提取到的200ug粗蛋白中加入200ul裂解液（8M urea/4%CHAPS/40mM Tris/65mM DTT），震荡混匀后，又加入2ul的1M DTT（使其终浓度为10mM，这个浓度似乎是必须的）。 问题来了，我的裂解液成分中加入65mM DTT对不对？貌似再加2ul1M DTT浓度不会是10mM啊？反而是裂解液中不加65mM DTT的话，最终浓度是对的。 到底问题出在哪里呢？有没有必要加入两次DTT？如果必须加的话，两步的作用有什么不同？ “200ug粗蛋白中加入200ul裂解液”这步该如何操作？还是志200ul裂解液中含200ug粗蛋白？ 请高手指教，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
计算机、0854电子信息（085401-058412）调剂
已经有5人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有13人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有3人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有5人回复
-
溴的反应液脱色
已经有7人回复
-
推荐一本书
已经有12人回复
-
基金申报
已经有4人回复
-
纳米粒子粒径的测量
已经有7人回复
-
常年博士招收(双一流，工科)
已经有4人回复
-
有没有人能给点建议
已经有5人回复
★
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
 |
2楼2016-09-26 09:39:38
3楼2016-09-26 12:15:27
★
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
 |
4楼2016-09-29 20:58:50
★
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
| 祝福！ |
5楼2016-09-29 21:00:10
★
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
fzhrobin(金币+1): 谢谢参与
|
|
6楼2016-09-29 21:11:12
 |
7楼2016-10-02 09:46:21
|
|
8楼2016-10-02 09:46:33
|
|
9楼2016-10-02 09:51:20