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lovewy

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.5
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在线: 8.3小时
虫号: 3751845
注册: 2015-03-19
专业: 蛋白质组学

[求助] 怎样检测一种蛋白磷酸酶对另一种蛋白的去磷酸化？已有1人参与

我是这样做的，先在细胞中转染两种质粒Flag-A和Myc-PPP（蛋白磷酸酶）（实验组），对照Flag-A和Myc。之后用Flag做IP。分别用GATA1，和ser-pi抗体显影。
打算是在GATA1量一样的情况下，实验组ser-pi会降低，说明蛋白磷酸酶对A发挥了作用。这样做对不对？

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1楼 2016-09-25 22:06:40

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yanwupeng

新虫 (初入文坛)

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注册: 2012-05-04
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

如果你的磷酸酶的活性中心是已知的，那么对照组用Myc-PPP(silence mutation)是不是会更好一点。另外我觉得最好再用pull down证明两个蛋白有direct interaction

2楼2016-09-27 23:59:07

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lwlong666666

新虫 (小有名气)

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注册: 2014-07-11
专业: 生殖生物学

请问楼主解决这个问题了吗？

3楼2021-06-07 22:27:06

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