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stickforver

银虫 (小有名气)

[求助] 诱导表达,大肠杆菌成棕褐色,怎么办 已有1人参与

最近在做蛋白表达,发现用IPTG诱导后,离心后的菌体成褐色,而对照是白色。超声破壁很浑浊,破壁后离心下来的沉淀也是褐色的,SDS-PAGE显示全菌里有我的目标蛋白,上清里却没有,沉淀里有。重复了很多次,尝试了不同的表达菌株,不同的培养温度和IPTG浓度,都是这种情况。大家有遇到这样的问题吗?我该如何解决?
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Neversaynever.
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star013

新虫 (知名作家)


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发自小木虫Android客户端
2楼2016-09-25 09:45:38
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cpuer.dog

新虫 (初入文坛)

3楼2017-04-08 08:35:55
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

会不会是表达量太高,都是包涵体~一般质粒本体表达也会有的,你可以不加诱导剂试试看正不正常
···
4楼2017-04-08 09:19:39
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Mr.XXX

新虫 (正式写手)

估计是破壁失败了,否则清液里不可能一点没有的

发自小木虫IOS客户端
5楼2018-05-07 14:25:30
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东东魔神

金虫 (小有名气)

请问您的超声破壁条件是什么?
6楼2018-08-28 11:10:16
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