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xht

铜虫 (小有名气)

[交流] 酶切遇到的奇怪问题

从头开始说吧, 我的目的片断连在t载体上  我要用的表达载体是pet30a  两者都双酶切后, 连接转化DH5a,单向测序是对的,但我提质粒 然后做双酶切 为什么载体的片断是对的 很清晰的一条带 而我的目的基因却被切碎了 变成弥散的了?(目的基因中没有相应的酶切位点)

谢谢各位大虾帮助!!!
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yuhuimeiye

木虫 (著名写手)

★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-14 21:04
你是拿酶切的质粒送测序的吗,如果是,那么测序结果正确,就说明可能是你酶中可能混进了别的内切酶,因为如果是外切酶的话,载体也应该被切碎
但是如果不是拿这个质粒测序的话,拿就是说明你转化时候混进了杂菌,多挑几个克隆就可以了。
2楼2008-11-23 09:02:30
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