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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 真菌基因敲除方法的选择
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felix_elf

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 真菌基因敲除方法的选择 已有1人参与

我有一个真菌的基因，想借助基因敲除进行功能分析。在网上看到的最好的方法好像是根癌农杆菌介导的遗传转化方法进行基因敲除。但是，同事说利用人工核酸内切酶（ZFN, TALEN，CRISPR-cas）更先进。不知道做过真菌基因敲除的伙伴，能不能说说两种方法的优劣。@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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1楼 2016-09-23 22:40:37
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董红红

铜虫 (小有名气)
我做的也是真菌基因的敲除，我们用的是同源替换的方法敲基因，然后利用遗传转化看基因的表达情况。

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2楼2016-09-24 16:32:46
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felix_elf

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董红红 at 2016-09-24 16:32:46
我做的也是真菌基因的敲除，我们用的是同源替换的方法敲基因，然后利用遗传转化看基因的表达情况。

没有尝试crispr cas9技术？你们那边用什么农杆菌的质粒？

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3楼2016-09-24 21:03:17
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五星小猪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最近也要做真菌的基因敲除，但是无从下手，也在考虑该用crispr cas9还是传统的同源重组方法。楼主你确定了吗？
或者推荐能推荐点文献或者论文吗？本人新接触的小白一枚！万分感谢
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4楼2016-10-01 17:18:50
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五星小猪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董红红 at 2016-09-24 16:32:46
我做的也是真菌基因的敲除，我们用的是同源替换的方法敲基因，然后利用遗传转化看基因的表达情况。

您好，最近也是要做真菌的基因敲除，但是本人小白在这方面知之甚少，层主能推荐点文献或者论文之类的吗？万分感谢！！
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5楼2016-10-01 17:20:53
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felix_elf

铁杆木虫 (正式写手)
同源重组

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6楼2016-10-02 00:40:42
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