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岳大白
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虫号: 3778310
注册: 2015-03-31
专业: 生物物理、生物化学与分子
[
求助
]
EMSA求助大神
最近刚刚开始学习做EMSA,曝光之后如图,1,3,5泳道为三种不同探针的实验组,2,4,6泳道为这三种探针的阴性对照组。生物素标记,蛋白量为4μg,探针量没计算。电泳85v,50min。转膜380mA,40min。
转膜后把尼龙膜截下来时,发现上样的泳道上有少量的胶附着,无法去除。曝光之后如图,泳道上有这样的一条带,而且下面的探针很弥散。不清楚什么原因,求指点。
这种情况是不是就排除了蛋白和这三种探针结合的可能呢?
实验要如何改进呢?
还有,我没有用x光片曝光的方法,而是采用成像系统直接积分扫描的照片。
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biostar2009
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飞约疯人院
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wizardfan
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2016-09-23 21:10:51
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专业: 法学
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4楼
2016-09-25 08:56:02
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岳大白
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2楼
2016-09-24 10:58:07
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岳大白
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3楼
2016-09-24 21:42:40
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liyushan1130
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专业: 细胞信号转导
没遇到过这种情况!感觉像胶和电泳有问题!
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5楼
2016-09-28 11:18:53
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