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wjqfeixiang木虫 (小有名气)
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[求助]
求助各位大神，有知道shuttle这个骨架的质粒在哪里可以查到吗？谢谢各位大神
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鄙人新手，入门一年半，手上得到一研究所的馈赠得到pCMV-Cre质粒。可以将cre/loxP导入到系统中达到基因重组的目的。 但是由于这个质粒做出来时间已经有些久了，所以研究所导师不能准确提供他的序列。 只知道这个Cre是以shuttle为骨架构建的。现在我不知道这个shuttle骨架分很多种吗？有什么方法可以查到么？能否查到它的单酶切位点可以简单做初步的验证。 主要的原因是因为我在用这个质粒的时候，很多很基本的地方出现了问题。比如它是卡那抗性的，我提取endo-free质粒的时候浓度总是很低。一般都10到20ng/ul这样。 现在将以前保种的有内毒素的质粒转化，发现并不能形成菌落。保种的菌可以形成。但是仍旧endo-free的盒子提不出来。我怀疑可能之前保种挑去的单克隆是存在问题的。 请问shuttle的骨架分很多种吗？有什么方法可以查到么？能否查到它的单酶切位点可以简单做初步的验证。 谢谢各位大神，祝您身体健康。  |
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