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新乡小树

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] 丝状真菌敲基因,想问下大家用的都是什么质粒,非常感谢。 已有1人参与

目前想做丝状真菌基因敲除工作,不想通过农杆菌介导,想通过构建两侧同源臂连到质粒上直接电转化完成,向大家请教下大家都用什么质粒来连接同源臂导入细胞?
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sunqibiao

新虫 (小有名气)

4楼2016-12-21 00:23:58
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书枫2010

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

个人感觉只要是在真核中可以用的质粒都可以,最重要的的是用什么promoter、marker来介导同源臂的转化
2楼2016-09-26 21:31:47
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lqdw12

新虫 (初入文坛)

不知道LZ现在这个方法做得怎么样呢,目前我用农杆菌介导转化 没有筛到突变体,很苦恼

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fight
3楼2016-12-21 00:04:16
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

可以不需要质粒,直接转化同源臂_抗性标记的融合片段。转化的话,可以尝试peg介导的原生质体转化方法

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做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2016-12-22 23:39:20
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