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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 超声破碎细胞
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mxy19920412

铁虫 (初入文坛)

[交流] 超声破碎细胞 已有6人参与

新手一个想要提取细胞的膜蛋白，用超声破碎细胞，一共用了大约5min，想请教下会不会时间太久了把我想要的膜蛋白给破坏了呢？
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1楼 2016-09-21 21:23:54
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547star

木虫 (著名写手)
★
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超声波一般可以设置间隔时间和工作时间，你可以考虑工作一下就停止间隔一下，样品间隔期冰水浴可以使温度不会太高。如果一直超声波5分钟，估计是不行了。
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为什么
2楼2016-09-22 00:08:38
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mxy19920412

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2016-09-22 00:08:38
超声波一般可以设置间隔时间和工作时间，你可以考虑工作一下就停止间隔一下，样品间隔期冰水浴可以使温度不会太高。如果一直超声波5分钟，估计是不行了。

我是超声1min，间隔2分钟的样子，一共的超声时间是5min，会不会时间太长了？
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3楼2016-09-22 10:16:35
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fenghuwuyu

木虫 (正式写手)

懒
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3楼: Originally posted by mxy19920412 at 2016-09-22 10:16:35
我是超声1min，间隔2分钟的样子，一共的超声时间是5min，会不会时间太长了？...

超声时间还得缩短，我试过30s超声的，胞内的蛋白比较多。
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信不信由你
4楼2016-09-23 12:11:05
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caihongwei

银虫 (小有名气)
★
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不知道楼主是否是提取的细菌的胞内蛋白，细菌的话还需要看是什么细菌。我做的单增李斯特菌超声20s，间隔20s共10min；金黄葡萄球菌的话时间就短许多。
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5楼2016-09-23 14:03:36
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mxy19920412

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fenghuwuyu at 2016-09-23 12:11:05
超声时间还得缩短，我试过30s超声的，胞内的蛋白比较多。...

那一共要超声几次呀，我是破的细胞~需要多大的功率和探头合适啊
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6楼2016-09-23 15:55:23
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mxy19920412

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by caihongwei at 2016-09-23 14:03:36
不知道楼主是否是提取的细菌的胞内蛋白，细菌的话还需要看是什么细菌。我做的单增李斯特菌超声20s，间隔20s共10min；金黄葡萄球菌的话时间就短许多。

破细胞，探头和功率是不是也不能太大啊~
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7楼2016-09-23 15:56:57
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六六六六六

新虫 (小有名气)
★
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你们太狠了啊，超声波也需要休息，我们一般是破2s就停4s,功率不能太大，跟探头要相对的

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8楼2016-09-23 18:13:54
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wsn2008

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by 六六六六六 at 2016-09-23 18:13:54
你们太狠了啊，超声波也需要休息，我们一般是破2s就停4s,功率不能太大，跟探头要相对的

是呢，他们太狠了。我们最多也就6秒，间隔6s

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9楼2016-09-24 16:03:28
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fenghuwuyu

木虫 (正式写手)

懒
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6楼: Originally posted by mxy19920412 at 2016-09-23 15:55:23
那一共要超声几次呀，我是破的细胞~需要多大的功率和探头合适啊...

其实正常的使用的话，细胞应该在300w左右，超声5s,停5s或10s,超声10-20min。
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信不信由你
10楼2016-09-24 16:48:55
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