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火麒麟90

铁虫 (初入文坛)

[求助] 如何从一株野生菌体中获取目标蛋白? 已有1人参与

我现在已经获取某一特殊菌株,可以催化特定的反应。现在我想从这株野生菌中获取能起到此功能的蛋白酶,到目前为止,此蛋白酶的基因序列和蛋白结构并没有报道,请问各位大神如何获取?
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只要自己去努力,没有做不到的事情!
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shuigezhi

金虫 (著名写手)

我觉得应该要鉴定菌株啊,提取DNA,测序比对,然后查看是否有同源性很高的且催化性质类似的酶序列。。。仅供参考啊哈哈
2楼2016-09-22 09:52:45
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
(1)看看能否诱导,如果底物诱导能增加蛋白表达量的话,你诱导和不诱导的比较一下,跑蛋白胶,如果有增量的条件,回收,MS鉴定蛋白,然后反推DNA,保守引物设计扩增
(2)诱导不行的话,看看有什么特征反应(比如透明圈或显色),看你的底物能否加到蛋白胶中,跑完蛋白胶,温浴,看看特征反应,切胶回收鉴定
帮助虫友,提升自己
3楼2016-09-23 11:12:17
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luckydog52

木虫 (著名写手)

确定是蛋白酶? 如果是 数据库可查啊

发自小木虫Android客户端
自信源于一次次成功的积累
4楼2016-09-23 11:33:23
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