应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » ppic9k载体电转毕赤酵母GS115，甲醇诱导外源表达
91/1返回列表
查看: 2191  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

erasedasd

新虫 (初入文坛)

[交流] ppic9k载体电转毕赤酵母GS115，甲醇诱导外源表达 已有3人参与

如题，经PCR检测载体已经转进去了，诱导表达有一个问题就是野生、空载没有目的条带，带目的基因的有条带，但是长度不对。而且差了很多，我的应该是45KD左右，但跑出来有70多KD。有没有朋友遇见过这种情况？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-09-21 12:30:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erasedasd

新虫 (初入文坛)
ppic9k载体电转毕赤酵母GS115，甲醇诱导外源表达

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-09-22 00:04:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很多蛋白在毕赤酵母表达会进行糖基化，糖基化后的大小会比非糖基化的理论大小大很多。论坛里有很多类似你这样问题的帖子了。
赞一下 回复此楼
为什么
3楼2016-09-22 00:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erasedasd

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 547star at 2016-09-22 00:11:16
很多蛋白在毕赤酵母表达会进行糖基化，糖基化后的大小会比非糖基化的理论大小大很多。论坛里有很多类似你这样问题的帖子了。

我用糖基化预测的软件预测过，并没有特别的糖基化位点啊。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-09-22 07:22:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erasedasd

新虫 (初入文坛)
有没有可能是胞内表达没分泌出来？？？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-09-22 09:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

烟雨莫问

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
酵母表达存在翻译后修饰，建议用WB检测

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-09-22 10:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

erasedasd

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 烟雨莫问 at 2016-09-22 10:09:01
酵母表达存在翻译后修饰，建议用WB检测

分子构建忘了加tag，现在想起来蠢哭了…

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-09-22 12:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by erasedasd at 2016-09-22 07:22:42
我用糖基化预测的软件预测过，并没有特别的糖基化位点啊。
...

这样的话，不知道你怎么得到开贴的结论的。另外，蛋白浓度有点低，不好比较，用三氯乙酸之类方法沉淀了再跑看看差别。
赞一下 回复此楼
为什么
8楼2016-09-23 00:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微皮蛋

新虫 (初入文坛)
楼主，知道是什么了吗70的，我的也出现了，我的目的蛋白应该是62

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2018-01-25 21:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 erasedasd 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭