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faile18

金虫 (小有名气)

[求助] WB结果分析 已有1人参与

利用BiFC实验的烟草叶片提取总蛋白，进行CO-IP实验，BiFC已证实蛋白之间可以互作。WB时anti-Myc mAb作为一抗，结果如图，泳道2为CO-IP产物，泳道3为总蛋白，A蛋白大小约为23kDa，互作蛋白B约为20kDa。

请教各位，1：是否可以通过此图说明蛋白A和B可以互作；
2：总蛋白WB为什么只有一条带，可能什么原因？

非常感激各位的帮助！

WB结果分析
Picture1.jpg
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1楼 2016-09-20 19:03:02
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
faile18: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-09-22 20:58:50
1. 分子量对不上，条带位于25kDa以上。50 kDa的条带不知道什么东西
2. myc是在A上还是B上没说清楚
3. 缺少负对照，用不表达myc标签蛋白的lysate做CO-IP 以及没有 bait做CO-IP
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2016-09-21 02:46:57
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faile18

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2016-09-21 02:46:57
1. 分子量对不上，条带位于25kDa以上。50 kDa的条带不知道什么东西
2. myc是在A上还是B上没说清楚
3. 缺少负对照，用不表达myc标签蛋白的lysate做CO-IP 以及没有 bait做CO-IP

2：Myc标签带在A蛋白上
赞一下 回复此楼
3楼2016-09-21 17:28:03
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