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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 色谱峰分叉
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱峰分叉 已有4人参与

流动相A：七氟丁酸－三氟乙酸－水(1:0.5:500)
B:甲醇
pH约3左右，安捷伦蒸发光检测器分离氨基酸时每个峰都分叉了，浓度大的分叉更严重，怀疑是不是柱子出问题了？（第二个图是第一个一个峰的放大图）

色谱峰分叉


色谱峰分叉-1


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1楼 2016-09-14 16:57:32
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tcm2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

一）、如果是成熟的分析方法，供试品溶液制备也没问题，就要考虑柱子的柱效下降了或柱头塌陷了，这种情况下，建议：1）将柱子冲洗干净；2）若确认是柱头塌陷了，用同种填料补上或反向低流速冲洗；
二）、若是新开发的方法，在柱效良好的情况下，建议1）优化供试品溶液的配置，尤其是稀释液的选择；2）减少进样量或更换为同品牌小粒径的色谱柱
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嘉嗳佟
4楼2016-09-18 11:08:50
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)
sepax HP-C18柱子

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2楼2016-09-14 16:59:02
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我认为最大可能是你的柱子要洗洗了，换根柱子比较一下。
也可能是流动相pH值要调调，需要你花时间优化一下。
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3楼2016-09-17 14:03:25
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嘉嗳佟

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by tcm2000 at 2016-09-18 11:08:50
一）、如果是成熟的分析方法，供试品溶液制备也没问题，就要考虑柱子的柱效下降了或柱头塌陷了，这种情况下，建议：1）将柱子冲洗干净；2）若确认是柱头塌陷了，用同种填料补上或反向低流速冲洗；
二）、若是新开发 ...

嗯。我是参照文献的方法，昨天把柱子冲洗之后今天进样量减少(稀释)后色谱峰好看多了，再试试看。

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5楼2016-09-18 12:25:57
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查看全部 7 个回答
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