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spec壮观霉素老是长杂菌
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avrchzx014
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我在构建载体,抗性是spec壮观霉素,配成平板,用DH5α感受态,转化质粒,老是平板上厚厚一层菌,不是一个个克隆,是一层菌,怎么回事。我换了几家公司,索来宝,生工都这样。有没有人遇到同样的问题,spec我用水配的。
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aliaaxmu2016
at 2016-09-09 10:45:39
让你不长那么密,你均匀涂板总有机会长满全板,梯度涂板总有长得稀的
...
之前太厚了,你涂的太少杂菌少了,转化克隆也就少了啊,而且前提杂菌更多啊。所以你这个方法好像不靠谱
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2016-09-09 10:49:06
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不要均匀涂板,一侧多涂,一侧不涂,中间过渡
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2016-09-09 10:36:52
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626333799
at 2016-09-09 10:35:27
spec是不是失效了
我换了好几家公司的抗生素,都是新买的。
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2016-09-09 10:42:01
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aliaaxmu2016
at 2016-09-09 10:36:52
不要均匀涂板,一侧多涂,一侧不涂,中间过渡
不是很懂,你的目的是什么
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2016-09-09 10:42:30
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avrchzx014
at 2016-09-09 10:42:30
不是很懂,你的目的是什么
...
让你不长那么密,你均匀涂板总有机会长满全板,梯度涂板总有长得稀的
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我不知道是不是感受态的原因,难道dh5α自带壮观霉素抗性
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13楼
2016-09-09 10:49:53
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avrchzx014
at 2016-09-09 10:49:06
之前太厚了,你涂的太少杂菌少了,转化克隆也就少了啊,而且前提杂菌更多啊。所以你这个方法好像不靠谱
...
你试试再说呗,你怎么知道那些密密麻麻的是杂菌呢?如果菌转的没问题,又排除实验低级错误,那么我想不到其它了
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14楼
2016-09-09 10:52:48
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请问楼主问题解决了没,我也遇到相似情况
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spec壮观霉素不太好用,建议从新构建质粒换抗性。
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小忆海
at 2016-11-15 16:01:57
请问楼主问题解决了没,我也遇到相似情况
没有解决
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19楼
2016-11-17 23:06:44
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at 2016-11-17 23:05:22
可是这个抗性我以前用了很久,都没有问题。现在这样,不知道哪里出问题了。换抗性不好办
...
spec壮观霉素不太好用,会出现抗性越来越强,建议从新构建质粒换抗性。经验之谈
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请问楼主现在解决了吗?
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