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avrchzx014

金虫 (小有名气)


已领完
spec壮观霉素老是长杂菌
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我在构建载体,抗性是spec壮观霉素,配成平板,用DH5α感受态,转化质粒,老是平板上厚厚一层菌,不是一个个克隆,是一层菌,怎么回事。我换了几家公司,索来宝,生工都这样。有没有人遇到同样的问题,spec我用水配的。

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avrchzx014

金虫 (小有名气)


引用回帖:
11楼: Originally posted by aliaaxmu2016 at 2016-09-09 10:45:39
让你不长那么密,你均匀涂板总有机会长满全板,梯度涂板总有长得稀的
...

之前太厚了,你涂的太少杂菌少了,转化克隆也就少了啊,而且前提杂菌更多啊。所以你这个方法好像不靠谱

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12楼2016-09-09 10:49:06
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匿名



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖仅楼主可见
7楼2016-09-09 10:35:27
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不要均匀涂板,一侧多涂,一侧不涂,中间过渡

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8楼2016-09-09 10:36:52
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avrchzx014

金虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 626333799 at 2016-09-09 10:35:27
spec是不是失效了

我换了好几家公司的抗生素,都是新买的。

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9楼2016-09-09 10:42:01
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avrchzx014

金虫 (小有名气)


引用回帖:
8楼: Originally posted by aliaaxmu2016 at 2016-09-09 10:36:52
不要均匀涂板,一侧多涂,一侧不涂,中间过渡

不是很懂,你的目的是什么

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10楼2016-09-09 10:42:30
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by avrchzx014 at 2016-09-09 10:42:30
不是很懂,你的目的是什么
...

让你不长那么密,你均匀涂板总有机会长满全板,梯度涂板总有长得稀的

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11楼2016-09-09 10:45:39
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avrchzx014

金虫 (小有名气)


我不知道是不是感受态的原因,难道dh5α自带壮观霉素抗性

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13楼2016-09-09 10:49:53
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aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)


引用回帖:
12楼: Originally posted by avrchzx014 at 2016-09-09 10:49:06
之前太厚了,你涂的太少杂菌少了,转化克隆也就少了啊,而且前提杂菌更多啊。所以你这个方法好像不靠谱
...

你试试再说呗,你怎么知道那些密密麻麻的是杂菌呢?如果菌转的没问题,又排除实验低级错误,那么我想不到其它了

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14楼2016-09-09 10:52:48
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匿名


本帖仅楼主可见
15楼2016-09-09 10:55:16
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小忆海

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主问题解决了没,我也遇到相似情况

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16楼2016-11-15 16:01:57
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梦想天行

木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
spec壮观霉素不太好用,建议从新构建质粒换抗性。

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17楼2016-11-15 22:37:41
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avrchzx014

金虫 (小有名气)


内容已删除
18楼2016-11-17 23:05:22
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avrchzx014

金虫 (小有名气)


引用回帖:
16楼: Originally posted by 小忆海 at 2016-11-15 16:01:57
请问楼主问题解决了没,我也遇到相似情况

没有解决

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19楼2016-11-17 23:06:44
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梦想天行

木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by avrchzx014 at 2016-11-17 23:05:22
可是这个抗性我以前用了很久,都没有问题。现在这样,不知道哪里出问题了。换抗性不好办
...

spec壮观霉素不太好用,会出现抗性越来越强,建议从新构建质粒换抗性。经验之谈

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20楼2016-11-17 23:52:05
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一支糖

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主现在解决了吗?
21楼2017-03-01 18:41:29
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2016-09-09 10:33   回复  
avrchzx014(金币+1): 谢谢参与
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zhang_xh3楼
2016-09-09 10:33   回复  
avrchzx014(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
下箭头4楼
2016-09-09 10:33   回复  
avrchzx014(金币+1): 谢谢参与
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God_1195楼
2016-09-09 10:33   回复  
avrchzx014(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
2016-09-09 10:34   回复  
avrchzx014(金币+1): 谢谢参与
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