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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 酶活测定
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能养鱼的猫

新虫 (小有名气)
已领完
酶活测定
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亲们，我现在遇到一点麻烦，我的酶属于胞内酶，发酵液在进行细胞破碎的以后，破碎液酶活很高，离心后的粗酶活很低，不知道该怎么办啊，我破碎的条件是200w,开2秒，停3秒，破碎15分钟，离心我用的是9000转，如果再低细胞碎片还能沉下去吗？大神们有没有什么好的建议啊

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1楼 2016-09-07 18:26:32
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能养鱼的猫

新虫 (小有名气)
大家这样我好伤心啊

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8楼2016-09-07 19:07:44
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a2703521

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你们这个既然是胞内酶，那全细胞测酶活很低这个是有可能的，说明你的底物没有进入细胞内反应。可以加点氯化钙或者其他一下增加细胞膜通透性的物质试试能不能提高酶活。9000转离心时间长点应该可以除掉大部分细胞碎片吧，这个具体没测过。
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9楼2016-09-08 09:27:24
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shuigezhi

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是催化中心遭到了破坏，加dtt试试！

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10楼2016-09-14 15:56:56
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shuigezhi

金虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by shuigezhi at 2016-09-14 15:56:56
可能是催化中心遭到了破坏，加dtt试试！

在破碎的时候加dtt！

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11楼2016-09-14 15:57:26
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qmgwfft2楼
2016-09-07 18:26   回复  
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songqingwen3楼
2016-09-07 18:26   回复  
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student_yjy4楼
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bujincun5楼
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药地6楼
2016-09-07 18:26   回复  
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183948227867楼
2016-09-07 18:28   回复  
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