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汕头大学海洋科学接受调剂
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新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂块初筛法 已有2人参与

大家好,本人新手一枚,最近再做产抗菌筛选,选择琼脂块法,由于第一次接触,想问下大家指示菌培养基必须是双层的么?还是单层就可以?如果单层一般是在培养基上涂布还是将菌悬液和培养基混匀呢?非常感谢。
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新虫 (初入文坛)

  帮帮忙  各位大神
2楼2016-09-07 19:29:31
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yuy111

银虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可将待筛选菌液直接涂布含抗菌素的平板上,单层平板就可以,也可以搞多层, 或打孔。
3楼2016-09-08 01:01:59
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shengqizhilv

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Overboard: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-09-18 08:56:44
请问楼主:你的指示菌是细菌还是真菌?是细菌的话最好制成双层平板,这样如果有抑菌作用,抑菌圈看起来会很明显;如果是真菌,最好是做对噬培养,因为真菌菌落较大且孢子浓度不好把握,涂布或者是制平板都不好操作。
Facingthegiants
4楼2016-09-08 16:08:59
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shengqizhilv at 2016-09-08 16:08:59
请问楼主:你的指示菌是细菌还是真菌?是细菌的话最好制成双层平板,这样如果有抑菌作用,抑菌圈看起来会很明显;如果是真菌,最好是做对噬培养,因为真菌菌落较大且孢子浓度不好把握,涂布或者是制平板都不好操作。

这样呀,我的指示菌是细菌,嘿嘿,谢谢你啦
5楼2016-09-08 16:45:45
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-08 01:01:59
可将待筛选菌液直接涂布含抗菌素的平板上,单层平板就可以,也可以搞多层, 或打孔。

谢谢啦  
6楼2016-09-08 16:47:20
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shengqizhilv

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Overboard at 2016-09-08 16:45:45
这样呀,我的指示菌是细菌,嘿嘿,谢谢你啦 ...

大家互相帮忙~~~
Facingthegiants
7楼2016-09-09 09:31:07
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shengqizhilv at 2016-09-09 09:31:07
大家互相帮忙~~~...

你好,想问一下你做过这方面的试验么?为什么我的试验最后只有几个琼脂块产生了抑菌圈,大多数没有?我是先将产抗生素的菌培养长出单菌落后打孔,将琼脂块放在平板里空培了两天之后,配制了双层指示菌平板,然后将琼脂块放在了平板上,培养了2天观察。产抗生素的链霉菌培养温度是28℃,之后放到指示菌平板(枯草芽孢杆菌)是37℃培养的,和温度有关系么?非常感谢。
8楼2016-09-14 15:48:30
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shengqizhilv

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Overboard at 2016-09-14 15:48:30
你好,想问一下你做过这方面的试验么?为什么我的试验最后只有几个琼脂块产生了抑菌圈,大多数没有?我是先将产抗生素的菌培养长出单菌落后打孔,将琼脂块放在平板里空培了两天之后,配制了双层指示菌平板,然后将 ...

出现这种情况很正常,抑菌试验不是很好做,一般只要晓得这个菌有抑菌效果就可以了,然后再用产抗生素的菌发酵,得到发酵产物,用发酵产物再验证下抑菌效果就可以,一般paper上做抑菌试验都是这个思路。如果想做出好看的抑菌结果(抑菌圈),在将琼脂块放到含指示菌的平板上后,最好先将平板在4度冰箱中放2天,让抗生素充分渗透到培养基中。
再者,我不是很懂你的意思,你是说:1.相同的产抗生素的链霉菌做抑菌试验;2.不同的产抗生素的链霉菌做抑菌试验。如果是1的话,在冰箱里放2天情况应该会好些;2的话不同的链霉菌产生的抗生素会不一样,抑菌效果也会不同。
如果你想确定是不是温度的原因,可以自己设计试验试下,试验都是在不断探索,加油!!
Facingthegiants
9楼2016-09-19 11:33:46
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by shengqizhilv at 2016-09-19 11:33:46
出现这种情况很正常,抑菌试验不是很好做,一般只要晓得这个菌有抑菌效果就可以了,然后再用产抗生素的菌发酵,得到发酵产物,用发酵产物再验证下抑菌效果就可以,一般paper上做抑菌试验都是这个思路。如果想做出好 ...

我是第一种,相同的产抗生素的链霉菌做抑菌试验,嘿嘿,我按照你的建议再试试,非常感谢。
10楼2016-09-29 09:19:30
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