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中性粒细胞吞噬功能的测定
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中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等，是机体天然免疫力的重要组成部分。 试剂及材料 1. 白色葡萄球菌 2. 肉汤培养基 3. 硷性美蓝液 操作方法 1. 菌液的制备 将白色葡萄球菌接种于中，放37℃温箱内培养12h左右；置水浴中加热100℃ 10min杀死细菌，用无菌生理盐水稀释成6×108 细菌/ml备用； 2. 用血红蛋白吸管吸取受试者耳垂或指血40μl，立即加入盛有20μl肝素（浓度为20U/ml）的洁净凹玻片的凹孔内，轻轻搅动混匀， 再加上述葡萄球菌菌液20μl充分混匀。然后置入铺有湿纱布的有盖容器内（此容器先放37℃温箱中预温），在37℃温箱中作用30min，其间每隔10min摇匀一次； 3. 作用完毕，取1小滴混合液置于洁净无油污的载玻片一端，推成薄片。待干后，用甲醇固定4～5min，硷性美蓝液染2～3min，置油镜下观察。随机计数100个中性粒细胞，分别记录发生吞噬和未吞噬的白细胞数，对有吞噬作用的白细胞，应同时记录所吞噬的细菌数； 结果分析 吞噬细胞%=即100个中性粒细胞中吞噬有细菌的细胞数； 吞噬指数=将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100，得到每个白细胞吞噬细菌的平均数，即为吞噬指数。 |
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